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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
基础培养基 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 Advanced DMEM-F12 Advanced DMEM-F12 DMEM-F12 penicillin-streptomycin - - - 1×P/S (5,000U/ml) 1×P/S (5,000U/ml) 1×P/S (5,000U/ml) dFBS(v/v) - 0.2% 2% - 1% -
a change in specific activity. 3.2. Preparation of Wnt3A CM for Fractionation 1. To the filtered CM from Section 3.1 , add Triton X-100 to1% (v/v), Tris-HCl, pH 7.5, to 20 mM, and NaN 3 to 0.01%(w/v) (e.g., to 930 mL CM, add 50 mL of 20% (v/v) TritonX
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