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- 2025年07月12日
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文献和实验柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中，分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质，还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达 500μL。 案例分析 外膜蛋白 A (Outer membrane protein A, OmpA） 是革兰氏阴性菌外膜蛋白质的主要
5 ml 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 ml 两种常用柱型。最终上样体积不要超过柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中，分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质，还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达
较高的蛋白首先使用 Capto S 进行阳离子交换粗纯，由于大部分宿主蛋白杂质带负电，会从阳离子柱上流穿，因此 Capto S 可以除掉绝大多数的背景蛋白。 然后使用 Superdex 75 10/300 GL分子筛进行精细纯化，此步可以去聚集体或痕量小分子杂质，至此就可以得到较纯的天然蛋白组分了。 Capto 系列的离子交换和疏水填料都拥有高动态载量，高流速，高化学耐受性的特点，可以在更短的时间完成更高处理量的纯化实验，时间和经济成本都可节省。 相信你已经get 到了天然蛋白纯化的精髓
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