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详见说明书
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55
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- 物种来源:
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- 细胞形态:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
常温/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁&悬浮
- 规格:
5×10^5
产品规格:5×10^5Cells/T25培养瓶
用途:用于科研实验。
产品资料:(点击获取)
公司经营的ELISA检测试剂盒种类齐全,可以检测:人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
均为现货,支持快递包邮,试剂盒提供免费代测服务
小鼠肝实质细胞
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 产品仅供科研先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时(4h左右),稳定细胞状态,切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检,拍照,记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞:若细胞密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,收集细胞瓶内的培养基,留8ml继续培养至80%左右再传代,瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗,可收集后4℃保存备用,可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基,一半用客户自备的培养基,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应而造成生长状态不佳。
小鼠肝实质细胞
细胞的冻存方法:
1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。
2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。
3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

一、细胞复苏的方法:
1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。
3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。
4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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文献和实验操作演示
麻醉小鼠,腹部消毒后剃毛,沿小鼠剑突下方腹部中线剖腹,用扩胸器暴露腹腔,挤出肝,结扎肝蒂,沿结扎线外侧无菌切除中叶和左外侧肝叶,约占肝体积的 70%,缝合腹部切口,形成小鼠急性肝损伤模型。肝脏是人体重要的器官,执行合成代谢,解毒和免疫防御等许多功能,外界环境各类因素常导致肝损伤,长期的肝损伤将诱发如肝炎、肝硬化和肝癌等疾病,最终会导致肝衰竭,肝损伤小鼠模型的建立将推动肝脏疾病的研究向前发展,为研究脂肪肝发病机制提供巨大帮助。
一、原理 DNA以核蛋白形式存在于细胞核中,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K及链霉蛋白酶E的应用使这两个原则得到了保证。 蛋白酶K或链霉蛋白酶E均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在SDS和EDTA存在下保持很高的活性。在匀浆后提取DNA的反应体系中,SDS可破坏细咆膜、核膜,并使组织蛋白与 DNA分子分离,EDTA抑制细胞中DNase活性,蛋白酶K或链霉蛋白酶E将蛋白质降解成小肽或氨基酸,使DNA分子完整地分离出来。再用酚
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