乐卡地平 100427-26-7（液相纯度）

热点聚焦丨活细胞「相分离」成像指南

生物大分子相变/相分离（Phase Transition / Phase Separation）是近些年生命科学领域的研究热点。  自 2009 年德国马普所 Clifford P. Brangwynne 和 Anthony A. Hyman 教授在线虫胚胎中发现 P granule 液-液相分离（LLPS）的现象，为这一领域研究做出奠基性工作开始，生物大分子的相变就逐渐成为生命科学研究者们的新宠。[26]但研究者一开始是如何发现细胞内相变过程的呢？  怀着浓厚的好奇心，我们追溯

哺乳动物细胞表达的难点和解决方案，都帮你整理好了

His-tag 时，常遇到的问题是寄主蛋白与填料的非特异性结合，在哺乳动物重组蛋白的纯化过程中，这样的情况更为明显。由于系统中有很多含有组氨酸（histidine）的残基的蛋白，这种蛋白结构与 his-tag 相似，容易与镍柱结合，因此导致目标蛋白纯度降低[13]。FLAG-tag 系统可在非变性条件下进行纯化，能得到高纯度、有活性的蛋白，但其缺点为纯化介质较为不稳定，且纯化成本高上许多[5]。另一常用的标签为 GST-tag，一个 26kDa 的蛋白，其特点是表达量高，具高度抗原性，常用来增加目标

膜蛋白纯化攻略分享

采用亲和加分子筛两种层析方法就能得到大量高纯度的蛋白样品往往是别人家的实验。到自己手上总会有各种惊喜… 今天的主角更加过分，在真正纯化之前就需要我们施展十八般武艺把它从细胞上「拽」下来。 没错，它就是膜蛋白… 人类基因组中，有大约 30% 的基因编码膜蛋白。当今已批准上市的药物中，有超过 50% 以膜蛋白为靶点，然而目前蛋白质结构数据库 (Protein Data Bank, PDB） 中膜蛋白比例不足 1%。 欲了解其功能，必解析其结构。是很多结构生物学家心头的念念不忘，随着冷冻