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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1 [COS1]
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
35
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1 [COS1]
- 规格:
详见说明书
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
订购信息:
| 产品名称 | 非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1 [COS1] |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X18392 |
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 此细胞株源自CV-1细胞株,经带有编码野生型T抗原的起始失活突变的SV40转染得到。 这些细胞含有一个来自SV40基因组全部早期区域的组成型拷贝。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
人瘦素受体(LEPR)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CD295, LEP-R, LR, LEPRD, OB-R, OBR Human LEPR(Leptin Receptor) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组LEPR浓度
人神经肽Y(NPY)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:NP-Y, PYY4 Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组NPY浓度。
人趋化因子C-X3-C-基元配体1(CX3CL1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Fractalkine , FKN, ABCD-3, C3Xkine, CXC3, CXC3C, NTN, NTT, SCYD1 Human CX3CL1(Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CX3CL1浓度
人白介素6受体(IL-6R)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IL6R, CD126, IL-6R-1, IL-6R-Alpha, IL6Q, IL6RA, IL6RQ, gp80 Human IL-6R(Interleukin 6 Receptor) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-6R浓度
人自噬基因(BECN1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ATG6, VPS30, Coiled-Coil, Myosin-Like BCL2 Interacting Protein, ATG6 Autophagy Related 6 Homolog Human BECN1(Beclin 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组BECN1浓度
人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:SLC2A1, DYT17, DYT18, DYT9, EIG12, GLUT, GLUT1, GLUT1DS, HTLVR, PED Human GLUT1(Glucose Transporter 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GLUT1浓度
Abz-G-p-nitro-Phe-P-OH Granuliberin-R Ac-Lys-(D-Ala)2 -OH AAA (D-Ala7)-AngiotensinI/II (1-7)
APLP1-derived Aβ -like peptide (1-28), APL1β 28 Alytesin D-AAAAAA Dnp-Pro-TNF-α (71-82)amide (human) Angiotensin I/II (1-7)
Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat) DF-2 Apelin-13 (human,bovine, mouse, rat) Antho-RWamide I Angiotensin I/II (1-6)
(Arg6,β -cyclohexyl-Ala8,D-Tic16,Arg17,Cys18)- Atrial Natri H-β -Asp-Phe-OH Apelin-12,(Des-Gln1)-Apelin-13 Antho-RPamide II Angiotensin I/II (1-5)
Atrial Natriuretic Factor (4-28) (human, bovine, porcine) β -Aspartame, H-β -Asp-Phe-Ome Anxiety Peptide,Octadecaneuropeptide, ODN Antho-RPamide I Angiotensin II Receptor Ligand
非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1 [COS1]FASTDIGEST MUNI 20 rxns 限制性内切酶和克隆酶
FASTDIGEST MUNI 50 rxns 限制性内切酶和克隆酶
FASTDIGEST PSP5II 50 rxns 限制性内切酶和克隆酶
FASTDIGEST SSPI 100 rxns 限制性内切酶和克隆酶
FASTDIGEST BSP143I 40 rxns 限制性内切酶和克隆酶
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验传代步骤比较传统:倒掉培养液->PBS洗2遍->胰酶0.25%消化->倒掉胰酶->加培养基->用吸管吹打均匀->分瓶->放置37度,5%CO2孵箱。我的体会是:1、消化时间和实验环境温度也有很大关系,我们实验室条件比较差,不能维持恒温(不过我想大部分实验室目前也还是做不到的)。夏天的时候,消化特别快。但是到了冬天,就很慢,要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以,经验很重要,如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断,首先效率太低,而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶,当感觉到有些泛白,瓶角有少许细胞
问:cos-7的转染1、细胞的培养:我们在培养细胞时发现该细胞长的很快,不到2天的时间就长满了;消化的时候老是成块的掉,如果消化时间加长,细胞也能成单个的,但是细胞的生长力又减弱了,请问要怎样来克服这一问题呢?2、转染前:转染前16-24h我们用含血清不含抗生素的MEM传进6孔盘,16h左右就发现细胞贴壁了,但是形态没有以前好,并且漂死细胞相当多。最初我们都以为是细胞没有贴壁,又把细胞放进培养箱,结果死细胞越来也多,请问是不是因为没有抗生素所以细胞才很容易死,并且形态不好的呢?3、转染:在6孔
COS-1 cells were created by transforming an established line of monkey epithelial cells, CV-1, with a defective mutant of SV40 (1 ). The SV40 mutant used carried a small deletion within the origin of replication and, although this construct
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