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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
牛肾细胞;MDBK(BVDV-free)
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
55
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
牛肾细胞;MDBK(BVDV-free)
- 规格:
详见说明书
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
订购信息:
| 产品名称 | 牛肾细胞;MDBK(BVDV-free) |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X18340 |
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由中国药品生物制品检定所细胞室王佑春主任赠送。MDBK细胞对包括牛腺病毒、牛细小病毒、牛腹泻病毒在内的多种病毒敏感,可用于这些病毒的扩增、检测研究。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C112
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
人血小板因子4(PF4)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CXCL4,PF-4,SCYB4 Human PF4(Platelet Factor 4) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PF4浓度
人白介素33(IL-33)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IL33, C9orf26, DVS27, IL1F11, NF-HEV, NFEHEV, Interleukin 33, IL-33 Human IL-33(Interleukin 33) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-33浓度
人脂多糖结合蛋白(LBP)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:LBP, BPIFD2 Human LBP(Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组LBP浓度
人胱天蛋白酶7(CASP7)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CASP7, CASP-7, CMH-1, ICE-LAP3, LICE2, MCH3, Caspase 7 Human CASP7(Caspase 7) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CASP7浓度
人生长分化因子11(GDF11)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:GDF11, BMP-11, BMP11, growth differentiation factor 11 Human GDF11(Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GDF11浓度
人抑制素B(INHB)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:INH-B Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组INHB浓度
Oxytocin (free acid) Trp-Gly GR 94800 Biotinyl-Neurokinin B Neuropeptide S (rat)
(d(CH2)51,Tyr(Me)2,Orn8)-Oxytocin Opiorphin L-659 877 (N-Me-Phe7)-Neurokinin B Neuropeptide W-23(human)
(Deamino-Cys1,D-Tyr(Et)2,Thr4,Orn8)- Oxytocin, Atosiban (Pyr1)-Opiorphin BIM-23127 (Pro7)-Neurokinin B Neuropeptide W-23 (rat)
(Ile8)-Oxytocin, Mesotocin Osteoblast ActivatingPeptide (mouse, rat) Neurokinin A (D-Pro2,D-Trp6•8,Nle10)-Neurokinin B Neuropeptide W-30(human)
(Phe2,Orn8)-Oxytocin α -Neoendorphin,Prodynorphin (175-184) (human, porcine) (Tyr0)-Neurokinin A Neuromedin B Neuropeptide W-30 (rat)
牛肾细胞;MDBK(BVDV-free)PAGI (BSPHI) 400U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
PAGI (BSPHI) 2,000U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
TATI 100U (5U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
XAGI (ECONI) 1,000U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
BPLI 100U (5U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验Protein Syntheses in Cell Free Systems
LEVEL III Materials Suspension culture of fibroblast cells (1 liter) 35 mM Tris-HCl, pH 7.4, 140 mM NaCl (TBS buffer) 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 10 mM KCl, and 1.5 mM magnesium acetate (TBS-M) 10X TBS-M
The Effects of Calcium-Free Seawater on the Development of Sea Urchin Embryos
Objective The purpose of this experiment is to determine the effects of calcium-free seawater on the development of sea urchin embryos. Embryos were placed in calcium-free sea after fertilization and at the initiation of gastrulation
The Effects of Calcium-Free Seawater on the Development of Sea Urchin Embryos
Objective The purpose of this experiment is to determine the effects of calcium-free seawater on the development of sea urchin embryos. Embryos were placed in calcium-free sea after fertilization and at the initiation of gastrulation
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