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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
37
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC
- 规格:
详见说明书
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
订购信息:
| 产品名称 | 家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X18286 |
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性家兔的骨髓。2012年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A62-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 质量规格:美国进口原装
95-C细胞,人低转移肺癌细胞 大鼠肾小管上皮细胞,NRK细胞 CL-0154MDCK(犬肾细胞)5×106cells/瓶×22'-脱氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 质量规格:美国进口原装,97%
TSCCa(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2BMS 582664Brivanib alaninate质量规格:>97%
HCF-c 人类的心脏成纤维细胞(HCF) 500,000cells 神经元细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)龙胆二糖Gentiobiose质量规格:>96%,原装进口
脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)西洛多辛Silodosin质量规格:>98%
TE 115.T细胞,人软组织纤维瘤细胞 SV40永生化的人胚肾上皮细胞,293T细胞 肾小球内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside
羊源细胞异鼠李素-3-O-新橙皮苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside
SFRP2 Others Mouse 小鼠 sFRP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 异土木香内酯(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isoalantolactone
CL-0063CNE(人鼻咽癌细胞)5×106cells/瓶×2异乌药内酯/异乌药内酯(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isolinderalactone
ST6GALNAC2 Others Mouse 小鼠 STHM / ST6GALNAC2 人细胞裂解液 (阳性对照) 异绿原酸C(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isochlorogenic acid C
KLE(人子宫内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2纺锤菌素二盐酸shēng huà shì jì容量:100克
Promocell C-28010 Mesenchymal Stem CellGrowth Medium, 间充质干细胞生长培养基(即用型) 500ml偶氮二异丁晴(阴凉)(*) 2,2'-czobis(2-mqthylpropionitnilq)
人气管平滑肌细胞总RNAHTSMC NA琼脂糖蛋白Ashēng huà shì jì容量:RT1克
PGLYRP1 Others Mouse 小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人细胞裂解液 (阳性对照) 大孔吸附树脂D101shēng huà shì jì容量:5克
HT1080 人成纤维瘤细胞,3-二基联本胺盐酸盐3,3',4,4'-Bipxenyltetramine tetraxy7nochloride
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSCEAC(小鼠艾氏腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0238U-87 MG(人神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA6-KT激动素1克USP级,95%
TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa2-基-1H-咪坐 2-Mqthylimidczolq 693-98-1
FIGF Others Rat 大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-metxoxybenzoicacid间甲氧基本酸25克超,99%
脂肪间质干细胞 Adult adipose derived mesenchymal stem cells碳酸shēng huà shì jì容量:100克
SW038-C2细胞,人脑胶质母细胞瘤细胞 致病性大肠埃希氏菌 人间充质干细胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μgPlateCountAgar 100g原装/500g原装 BD 247930
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验有的胰蛋白酶。将细胞再悬浮于培养液中,按2~5×105/ml再次接种传代于新的培养瓶中。当这些细胞生长接近融合层时,即得到骨髓MSC。传至3~5代的MSC按1×105cells/cm2密度接种于放置有盖玻片的6孔板内,以制备细胞爬片。注:贴壁细胞的消化,应掌握各类型细胞不同的消化时间,避免过度消化,损伤细胞活力;或消化不足,不能充分解离成单细胞。如为长期实验,每个月重新复苏一支细胞,避免长期传代引起细胞特性变异。
NEB 发布:GenomONE™ 为诱导 iPSC 形成「保驾护航」
间充质干细胞(MSC, mesenchymal stem cells)是干细胞家族的重要成员,属于多能干细胞,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。诱导性多能性的间充质干细胞(iPMSCs)是药物筛选、再生医学和细胞治疗的新型候选药物。然而,用于生成骨髓间充质干细胞的诱导性多能性间充质干细胞(iPSC),在导入编码基因的转录因子中,往往伴随有在靶细胞基因组的插入时发生突变的风险。 由于近年来对骨髓间充质干细胞认知地深入,在造血系统、免疫
R&D Systems:如何提高MSC的扩增且不损失其分化潜能
摘要 骨髓间充质干细胞(MSC)为组织工程学和再生医学带来重大希望。临床及临床前对MSC的应用需要它们在培养基中以最大效率扩增,并且维持分化为主要细胞系的能力。胎牛血清(FBS)是一种体外维持hMSC生长的要素,但是批次之间的差异能明显影响实验结果。为了制造能始终如一地使hMSC最优扩增的生长培养基,我们测试了几种来源的FBS的不同浓度。我们的结果表明FBS样品间的扩增效率差异很大,一次传代后可扩增1.8至4.2倍。使hMSC最大扩增的FBS批次用于开发StemXVivoTM骨髓间充质干细胞
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