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人胚肾细胞;293 [HEK-
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人胚肾细胞;293 [HEK-293]
A类
上海西格
20
贴壁生长
电询
否
ATCC
订购信息:
细胞名称 人胚肾细胞;293 [HEK-293]形态特性 上皮样生长特性 贴壁生长 特征特性 早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1~4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:10~1:20传代,每2~3天换液1次。传代情况 P20冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;同工酶 染色体 使用权限 A类细胞的种类:第一种:是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。第二种:是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。细胞培养操作规程:一.培养基及培养冻存条件准备:1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。二.细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。人生长激素释放肽(Ghrelin) Human Ghrelin ELISA Kit 96T/48T人谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX) Human GSH-PX ELISA Kit 96T/48T人同型半胱氨(HCY) Human HCY ELISA Kit 96T/48T人脂多糖结合蛋白(LBP) Human LBP ELISA Kit 96T/48T人脂多糖(LPS) Human LPS ELISA Kit 96T/48T人髓样分化蛋白-2(MD2) Human MD2 ELISA Kit 96T/48T人α1微球蛋白(MGα1) Human MGα1 ELISA Kit 96T/48T人β2微球蛋白(MGβ2) Human MGβ2 ELISA Kit 96T/48T(NO)ELISA Human NO ELISA Kit 96T/48T人NF-kB Human NF-kB ELISA Kit 96T/48T人晚期氧化蛋白(AOPP) Human AOPP ELISA Kit 96T/48T人不对称二甲基精氨酸(ADMA) Human ADMA ELISA Kit 96T/48T人BTC Human Betacellulin ELISA Kit 96T/48T人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA Kit Human Brain derived neurotrophic facor ELISA Kit 96T/48T人血管生成素-2(ANG-2) Human Angiopoietin-2 ELISA Kit 96T/48T人血管生成素-1(ANG-1) Human Angiopoietin-1 ELISA Kit 96T/48T人血管生长素(Angiogenin) Human Angiogenin ELISA Kit 96T/48T人角化细胞内分泌因子(AR) Human Amphiregulin ELISA Kit 96T/48T人血管紧张素II(ANG II) Human angiotension II ELISA Kit 96T/48T人血管紧张素I转化酶(ACE) Human Angiotensin I converting enzyme ELISA Kit 96T/48T人环-磷酸腺苷(cAMP) Human cAMP Elisa Kit 96T/48T人白细胞活化黏附因子(ALCAM) Human ALCAM Elisa Kit 96T/48TTASK 3/KCNK9 酸敏感性钾离子通道蛋白抗体 0.2mlTSLP 胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体 0.1mlMyosin-XVIIIb 肌球蛋白XVIIIb抗体 0.2mlRBPJK/RBP-J Notch转录调控蛋白RBPJK抗体 0.2mlMaltose Binding Protein/MBP 麦芽糖结合蛋白抗体 0.2mlHPV33 E6 人类乳头状瘤病毒33抗体 0.2mlHPV33 E7 人类乳头状瘤病毒33抗体 0.2ml人胚肾细胞;293 [HEK-293]PHGDH 磷酸甘油酸脱氢酶抗体 0.2mlPASK/STK39 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体 0.2mlHES1 转录因子HES-1抗体 0.2mlFactor VIII 第八因子抗体 0.1mlNoggin 指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体 0.2mlGGT1/CD224 γ谷氨酰转移酶抗体 0.1mlTAGL2/TAGLN2 细胞骨架相关蛋白2抗体 0.2mlPeroxiredoxin 2/PRXII 硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ/巯基抗氧化蛋白抗体 0.1ml注意事项:1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。细胞处理:1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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