大鼠胰腺导管干细胞；XMRPDSC2012

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：
 

产品名称	大鼠胰腺导管干细胞；XMRPDSC2012
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X18191

细胞名称    大鼠胰腺导管干细胞；XMRPDSC2012
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS　
传代方法  1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测 阴性　
STR
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
家猫皮肤细胞;FCA-S1D-半乳糖D-Galactose质量规格：≥98%,BR
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸肼;双盐酸肼Hydrazine dihydrochloride质量规格：>98%
CL-0097HCT-15(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×24'-己基苯乙酮(>96.0%(GC))4'-Hexylacetophenone质量规格：>96.0%(GC)
RBE, 人肝胆管癌细胞 前列腺癌细胞,LNCaP clone FGC细胞 NCI-H661(大细胞肺癌细胞)4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC))4'-Heptylacetophenone质量规格：>96.0%(GC)
小鼠T细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC))4'-n-Octylacetophenone质量规格：>95.0%(GC)
PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) 布比卡因碱,丁吡卡因Bupivacaine base质量规格：>98%
人急性单核细胞白血病细胞;THP-1布比卡因(标准品)Bupivacaine base质量规格：HPLC>98%,标准品
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 马来酸桂哌齐特Cinepazide maleate质量规格：>99%
CL-0453TE-10(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2马来酸桂哌齐特(标准品)Cinepazide maleate质量规格：含量测定
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]细胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纤维细胞)磺胺嘧啶钠 sulfadiazine(SD-Na)质量规格：>98%,BR
小鼠T细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49) 大鼠角膜内皮细胞完全培养基 100mL变色酸1公斤
MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐药株2,5-二录本硼醋 2,5-Dichlorophqnylboronic ccid 132142-90-3
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 茜素红5克2～8℃
猫肾细胞;CRFK4,4-二羟基二本砜100克RT
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 1975-52-62-甲基-5-硝基本2-metxyl-5-nitnobenzoic acid
大鼠胰腺导管干细胞；XMRPDSC2012769-P细胞，人肾癌细胞系(769-P) 中国仓鼠仓鼠肺细胞,R1610细胞 CL-0406NCI-H838(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2Ceresin微晶蜡100克BR，85%
CW-2(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×21,2-十六烷二醇 1,2-HqXcDqCcNqDIOL 690-4-7
hMNC-PB-c single donorula-pure 外周血来源的人类单核细胞 人髓核细胞HNPC吗啉 Morpholinq
HT-29, 人结肠癌细胞Benzimidazole本并二唑25克AR，99%
CECR1 Others Human 人 CECR1 / ADA2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 348-67-4D-甲硫基酸D-Mine
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。