登革病毒型RT-LAMP试剂盒

登革病毒型RT-LAMP试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

GPR30    G蛋白偶联受体30抗体
GDAP2    神经节苷脂诱导分化相关蛋白2抗体
GAPDH    3-磷酸甘油醛脱氢酶
GDNFRA    GDNF家族受体α-1抗体
Gemin 2    运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗体
GLUT1    葡萄糖转运蛋白1抗体
GLUT2    葡萄糖转运蛋白2抗体
Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211)    磷酸化糖皮质激素受体抗体
GPR158     G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体
Gamma catenin    γ连环蛋白/Catenin γ /γ链接素抗体
GABARAPL2    G1氨基丁酸A型受体相似蛋白2抗体
Gab1    接头蛋白Gab 1抗体
Phospho-GSK3 alpha (Ser21)    磷酸化糖原合酶激酶3α抗体
phospho-GAP43 (Ser41)    磷酸化神经生长相关蛋白43抗体
GSK-3 Beta (CT)    糖原合酶激酶-3β抗体
GRGDS    抗粘附多肽抗体
登革病毒型RT-LAMP试剂盒GLIPR1    脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体
GPM6A    神经细胞膜糖蛋白M6a
GPR101    G蛋白偶联受体101抗体
GLP-1R    胰高血糖素样肽-1受体/GLP-1受体抗体
GPI    糖磷脂酰肌醇抗体
phospho-gp130 (Ser782)    磷酸化gp130抗体
Glutathione Transferase zeta 1    谷胱甘肽S转移酶ζ1抗体
GLYAT    甘胺酸-N-酰基转移酶抗体
GLYATL1    甘胺酸-N-酰基转移酶样1抗体
G3PP     转运蛋白G3PP抗体
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser645)    磷酸化葡萄糖合成酶1抗体
Glycogenin 1    糖原蛋白1
GRAP    生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白抗体
GRB 14    生长因子受体结合蛋白14抗体
GLYCTK    HBeAg结合蛋白4/甘油激酶抗体
GLYATL2    甘胺酸-N-酰基转移酶样2抗体
Glypican 2    磷脂酰基醇蛋白聚糖2抗体
GLYR1    氧化还原酶GlyR1/核蛋白60抗体
GM2A    神经鞘脂激活蛋白3抗体
GMDS    甘露糖脱水酶GMDS抗体
GMEB1    糖皮质激素调节元件结合蛋白1抗体
GMEB2    糖皮质激素调节元件结合蛋白2抗体
GMFG    胶浆成熟因子γ/GMF-γ抗体
GMP Synthase    谷氨酰胺转移酶GMPS抗体
GMPPB    GDP甘露糖焦磷酸化酶B抗体
GPBAR1    G蛋白偶联胆汁酸受体1
GNPDA1    葡萄糖6-磷酸脱氨酶1抗体
GNPDA2    葡萄糖6-磷酸脱氨酶2抗体
GNPNAT1    葡萄糖6-N-乙酰基转移酶1抗体
GLS1    谷氨酰胺酶1抗体
GPR161    G蛋白偶联受体GPR161蛋白抗体
GPR180    G蛋白偶联受体GPR180蛋白抗体
GPS2    G蛋白通路抑制物蛋白2抗体
GPR177    G蛋白偶联受体GPR177蛋白抗体
产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。