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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
RT-LAMP kit for classical swine fever virus vaccine strain
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
GilZ 糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白抗体
GGT6 γ-谷氨酰转肽酶6抗体
GABRD G氨基丁酸受体δ/GABAA Rδ抗体
GABRG1 G氨基丁酸受体γ1/GABAA Rγ1抗体
phospho-GABRG2(Ser366) 磷酸化γ氨基丁酸γ2受体抗体
GABRG3 G氨基丁酸受体γ3/GABAA Rγ3抗体
GABARE G氨基丁酸受体ε/GABAA Rε抗体
GABARAP γ-氨基丁酸受体相关蛋白抗体
GABRQ G氨基丁酸A型受体θ/GABAA Rθ抗体
GABRR1 G氨基丁酸A型受体rho1 /GABAA Rρ1抗体
GABRR2 G氨基丁酸A型受体rho2 /GABAA Rρ2抗体
GABABRBP G氨基丁酸B型受体结合蛋白抗体
GRID1 谷氨酸受体δ1/GluR-δ1抗体
GRINA 谷氨酸受体相关蛋白1抗体
GARP 环磷酸鸟苷门控通道蛋白CNG4抗体
Glycine Receptor alpha 1 + alpha 2 甘氨酸受体α1+甘氨酸受体α2抗体
Glycine Receptor alpha 3 甘氨酸受体α3/GlyR α3抗体
GPRC5D G蛋白偶联受体C5家族亚型D抗体
GPR18 G蛋白偶联受体18抗体
GPR65 G蛋白偶联受体65抗体
Gax 生长终止特异性同源盒基因抗体
GLUR2 谷氨酸受体2抗体
Glutamate receptor 3 谷氨酸受体3抗体
GLUR4 谷氨酸受体4抗体
猪瘟病毒疫苗株RT-LAMP试剂盒GRM1 促代谢型谷氨酸受体1抗体
GLRA4 甘氨酸受体α4抗体
GDF8 生长分化因子8抗体
phospho-GSK-3 Beta(Ser9) 磷酸化糖原合酶激酶-3β抗体
Glu-Glu Tag Glu-Glu tag抗体
GLP-2 胰高血糖素样肽-2抗体
GlyR alpha 1 + 2 + 3 甘氨酸受体alpha 1/2/3型抗体
GNAI3 抑制型G蛋白α3抗体
GnRHR 促性腺激素释放激素受体抗体
GRB2 生长因子受体结合蛋白2抗体
GATA3 GATA结合蛋白3抗体
GM-CSFR alpha 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α抗体
Gremlin 骨形态形成蛋白拮抗蛋白抗体
GCN2 蛋白激酶GCN2蛋白抗体
GPR78 G蛋白偶联受体GPR78蛋白抗体
GIRK2 G蛋白激活内流钾通道蛋白2抗体
GRB10 生长因子受体结合蛋白10抗体
Phospho-GRB10 (Tyr67) 磷酸化生长因子受体结合蛋白10抗体
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) 磷酸化糖原合酶激酶3β抗体
Phospho-GCN2 (Thr899) 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体
phospho-GCN2 (Thr667) 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体
Phospho-Gab1 (Tyr627) 磷酸化接头蛋白Gab 1抗体
Phospho-Gab1 (Tyr659) 磷酸化接头蛋白Gab 1抗体
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 磷酸化葡萄糖合成酶1抗体
GCNT1 GCNT1葡萄糖转移酶抗体
GIPC1 胰岛素样生长因子1受体相互作用蛋白1抗体
Guanylyl Cyclase alpha 1 鸟苷酸环化酶α1/GCS-α-1抗体
GPR125 G蛋白偶联受体125抗体
GPR84 G蛋白偶联受体84抗体
GPCR G2A G蛋白偶联受体G2A抗体产品特点:
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2. 反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3. 抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记:
TaqMan法
TaqMan探针的特性:
(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)
(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针 相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表: 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
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文献和实验,SVDV和VSV特异性扩增的3对引物,并通过对扩增体系和扩增条件的优化,建立了特异、敏感、快速的能同时检测FMDV,SVDV和VSV的多重RT-PCR方法。 1 材料与方法 1.1 病毒株 猪水疱病病毒RNA、标淮阳性血清、标淮阴性血清和参考样品由英国动物卫生研究所Pirbright实验室惠赠;VSV-NJ病毒株和VSV-IND病毒株从美国国家兽医服务实验室(NVSL)引进,由本实验室保存;FMDV O疫苗株从云南保山疫苗厂引进,由本实验室保存。 1.2 试剂
设计 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=4028497&sty=1&tpg=31&age=0 请教:请教我有关RT-PCR引物设计的方法,比如要做大鼠的PDGF-BB的RT-PCR,如何设计?有那些步骤?万分感激! http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=4029507&sty=1&tpg=31&age=0 RACE-PCR扩增不出来怎么办? http://www.dxy.cn/bbs/post/view
PCR对照 特异性PCR试剂盒 PCR克隆试剂盒 RNA RNase检测/去除 RT-PCR试剂 RT-PCR标准品 定量PCR试剂 定量PCR标记 总RNA分离纯化盒 PCR
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