类鼻疽伯克霍尔德菌LAMP试剂盒

类鼻疽伯克霍尔德菌LAMP试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

CD239    B细胞粘附分子CD239抗体
CPB2    胰羧肽酶B2抗体
CERKL    视网膜色素变性蛋白26抗体
CROT    过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体
C16orf7    16号染色体开放阅读框7抗体
C16orf57    16号染色体开放阅读框57抗体
C3orf37    3号染色体开放阅读框37抗体
C3orf49    3号染色体开放阅读框49抗体
C1orf220    1号染色体开放阅读框220抗体
Calcyphosine 1    钙磷蛋白1抗体
Calcyphosine 2    钙磷蛋白2抗体
phospho-CSEN (Ser63)    磷酸化钾通道相互作用蛋白3抗体
C16orf61    16号染色体开放阅读框61抗体
CNG3    视锥感光细胞环磷酸鸟苷门控通道蛋白CNG3抗体
CNGB3    环核苷酸门控阳离子通道蛋白β3/CNG-β3抗体
c-Abl    非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
CCDC152    卷曲螺旋结构域蛋白152抗体
CHPT1    甘油二酯胆碱磷酸转移酶抗体
Chromogranin B    嗜铬粒素B抗体
Cullin 5    血管加压素激活钙启动受体蛋白1抗体
Cyp2-j3    细胞色素P450Ⅱj3抗体
CLCA4    钙激活氯离子通道4抗体
CDK6    周期素依赖性激酶6抗体
CDK7    周期素依赖性激酶7抗体
CDK8    周期素依赖性激酶8抗体
CDKN1C    周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体
Chondrocalcin    Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体
c-fos    c-fos抗体
Chromogranin A    嗜铬粒素A抗体
CGRP    CGRP降钙素基因相关肽抗体
ChAT    ChAT胆碱乙酰转移酶抗体
CNTD2    细胞周期蛋白N端结构域蛋白2抗体
Coronin 1a    肌动蛋白结合蛋白CORO1A抗体
Cecropin    抗菌肽/天蚕素抗体
类鼻疽伯克霍尔德菌LAMP试剂盒Camk1g    钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗体
CCR8    细胞表面趋化因子受体8抗体
CMTM2    趋化素样因子超家族成员2抗体
CTH    胱硫醚γ裂解酶抗体
CFTR    囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体
CKIP-1    酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体
CD40L    CD40L抗体
Alpha s1 Casein    α-s1酪蛋白抗体
CIDEB    CIDEB抗体
Scavenging Receptor SR-BI    高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体
COPS7A    信号转导蛋白亚基7A抗体
产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。