布鲁氏杆菌属通用可视化LAMP试剂盒

布鲁氏杆菌属通用可视化LAMP试剂盒运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
DISC1 (CT)    DISC1 C端抗体
DISC1 (NT)    DISC1 N端抗体
DPPA2    多能发育相关基因2抗体
DCC    结肠直肠癌缺失基因抗体
DOPA Decarboxylase    多巴胺脱羧酶抗体
beta Defensin 1    防御素β1/Defensin β1抗体
Digoxin    抗体
DLX4    DLX4抗体
Deltex 1    DTX1抗体
DUSP1    丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体
DUSP4    丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体
DOCK1    细胞质分裂付出蛋白1抗体
DNER    脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体
DUX3    DUX3蛋白抗体
DAP1    死亡相关蛋白1抗体
DNAH9    轴丝动力蛋白重链9抗体
Phospho-DLP1 (Ser616)    磷酸化动力相关蛋白1抗体
DNA Ligase IV    DNA连接酶4抗体
DPP6    二肽基肽酶6抗体
DHFR    二氢叶酸还原酶抗体
DIS3L    有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体
DIS3L2    有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体
DOM3Z    DOM3Z蛋白抗体
布鲁氏杆菌属通用可视化LAMP试剂盒Dishevelled 2    蓬乱蛋白2抗体
phospho-Dishevelled 2 (Thr224)    磷酸化蓬乱蛋白2抗体
DR1 protein    转录下调蛋白1抗体
DHRS2    脱氢酶/还原酶家族成员2抗体
DSPP    牙本质磷蛋白抗体
Dermokine beta    Dermokine β蛋白抗体
DPCR1    DPCR1蛋白抗体
DERP6    表皮乳头源性蛋白6抗体
DUSP7    双特异性蛋白磷酸酶7抗体
DUSP26    双特异性蛋白磷酸酶26抗体（丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶8）
DAO1    阿米洛利结合蛋白1抗体
DBF4A    S期激酶活化蛋白DBF4A抗体
DSN1    着丝粒相关蛋白DSN1抗体
DCDC2    双皮层蛋白结构域蛋白DCDC2抗体
DAGLA    神经干细胞树突调节蛋白DAGLα抗体
DOK4    对接蛋白4抗体
DULLARD    DULLARD蛋白抗体
DYRK1A    丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MNB抗体
DGCR6    无胸腺症相关蛋白DGCR6/迪格奥尔格综合征关键基因6抗体
Doppel    朊蛋白DPL抗体
DMPK    肌强直性营养不良蛋白激酶抗体
DIS3    有丝分裂控制蛋白dis3抗体
DACT1    肝癌新基因3蛋白抗体
Dact2    Dapper2蛋白抗体
DACT3    Dapper3蛋白抗体
DNTNP    背神经管核蛋白抗体
DDAH1    双甲基精氨酸水解酶1抗体
DCAMKL1    丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶DCAMKL1抗体
Dscam    唐氏综合征细胞粘附分子抗体
DPPL1    磷脂酸磷酸酶HTPAP抗体
DLK1    穿膜蛋白DLK1抗体（C端）
DHFRL1    二氢叶酸还原酶样1抗体
DUT    脱氧尿苷三磷酸酶DUT抗体
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。