油菜内标准PEP基因染料法PCR试剂盒

油菜内标准PEP基因染料法PCR试剂盒运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

phospho-Tau protein    磷酸化微管相关蛋白抗体
phospho-Tau protein    磷酸化微管相关蛋白抗体
phospho-Tau protein    磷酸化微管相关蛋白抗体
TRAP80    MED17抗体
TRIP13    甲状腺激素受体相互作用13/乳头瘤病毒16型E1结合蛋白抗体
THRB1    甲状腺激素受体β抗体
THSD1    血小板跨膜反应蛋白1抗体
CD142    组织因子抗体
TNFSF13    肿瘤坏死因子配体超家族成员13抗体
TSPY1    睾丸特异定蛋白质编码Y1抗体
TM4SF3    跨膜蛋白4超家族成员3抗体
TLR7    Toll样受体7抗体
TLX3    T细胞白血病同源盒蛋白3抗体
TUSC2    血小板源性生长因子A相关蛋白2抗体
TMEM106B    跨膜蛋白106B抗体
Tau421    微管相关蛋白Tau421抗体
CABP4    瞬时受体电位通道蛋白4抗体
TPTE    肿瘤/睾丸抗原抗体44抗体
TACC1    乳腺癌、胃癌抗原抗体GA55抗体
TBRG4    转化生长因子β调节蛋白4抗体
TYK3    酪氨酸蛋白激酶3抗体
phospho-TYK3    磷酸化酪氨酸蛋白激酶3抗体
TRPM1    瞬时受体电位离子通道蛋白1抗体
TRPM6    瞬时受体电位离子通道蛋白6抗体
TMEM2L    跨膜蛋白2样蛋白抗体
phospho-Tau protein    磷酸化微管相关蛋白抗体
Lefty    转化生长因子β4抗体TGF β4
TCF12    转录因子12抗体
TMP21    跨膜转运蛋白21抗体
TSBP    睾丸特异蛋白抗体
THAP2    THAP2蛋白抗体
TRPM5    瞬时受体电位离子通道蛋白5抗体
TRPM4    瞬时受体电位离子通道蛋白4抗体
TSARG2    精子形成相关凋亡蛋白2抗体
Transportin 1    转运蛋白1抗体
THAP1    核凋亡因子THAP1抗体
TIA1    细胞毒颗粒相关蛋白TIA-1抗体
THYN1    胸腺细胞核蛋白1抗体
TNFAIP3 interacting protein 3    肿瘤坏死因子α诱导相互作用蛋白3抗体
TRPV3    辣椒素受体3抗体
TEX261    TEX261蛋白抗体
TSHR    促甲状腺素受体抗体
油菜内标准PEP基因染料法PCR试剂盒Phospho-TrkA + TrkB    磷酸化酪氨酸激酶A抗体
TLR3    Toll样受体3抗体
TCRG    T细胞受体γ抗体
Transketolase     转酮醇酶抗体
TPH    色氨酸羟化酶抗体
TRAIL    肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗体
Prealbumin    转甲状腺素蛋白/前白蛋白抗体
TRF1    端粒体复制结合因子1抗体
TrkA    酪氨酸激酶A抗体
特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。