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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
41
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)
- 规格:
详见说明书
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
订购信息:
| 产品名称 | 小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934) |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 |
|
形态特性 球形克隆
生长特性 贴壁生长
特征特性 小鼠胚胎干细胞;在缺乏滋养层或条件培养基时,这株细胞自发分化成胚胎结构。 它们可以注射回胚泡并参与形成生殖系。 未分化细胞可以通过基因靶向技术进行基因改良。贴壁生长;形成球形克隆。
培养条件 干细胞培养基
传代方法
传代情况 PN
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
钩吻素己 HPLC≥98% 20mg ELISAKit8-epi-PGF2α兔8-异构前列腺素规格:48T/96T
钩吻素甲 GC≥98% 20mg ELISAKitA1c人糖化血红蛋白A1c规格:48T/96T
钩吻素子 HPLC≥98% 20mg ELISAKitAAV人腺相关病毒规格:48T/96T
狗牙花碱D HPLC≥98% 20mg ELISAKitAAV人腺相关病毒规格:48T/96T
枸橘苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitABCA1人腺苷三0酸结合盒转运体A1规格:48T/96T
枸杞多糖 鉴别 500mg ELISAKitABCG2人腺苷三0酸结合盒转运体G2规格:48T/96T
柠檬酸 HPLC≥98% 200mg ELISAKitABP人雄激素结合蛋白规格:48T/96T
枸橼酸血根碱 HPLC≥98% 20mg ELISAKitAC-1人腺苷酸环化酶1规格:48T/96T
构树碱A HPLC≥98% 5mg ELISAKitACA人肾上腺皮质抗体规格:48T/96T
古伦宾 HPLC≥98% 20mg ELISAKitACEⅠ人血管紧张素Ⅰ转化酶规格:48T/96T
小鼠紧张素转化酶(ACE)ELISAKit Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate 16
小鼠紧张素转化酶(ACE)ELISAKit Bisdemethoxycucurmin 中文名:双去甲氧基姜黄素 分子式:C19H16O4
小鼠紧张素转化酶 英文名称: Angiotensin Conveing Enzyme 规格: 48T/96T 英文缩写: ACE Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 度:98.0%
小鼠紧张素原elisa试剂盒 小鼠紧张素原试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠紧张素原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠紧张素原试剂盒、小鼠紧张素原elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Methyl 2-ethoxybenzimidazole-7-carboxylate 中文名: 分子式:C11H12N2O3
小鼠紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 Methyl 2,2-dithienylglycolate 中文名: 分子式:C11H10O3S2 度:98.0%
(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone 中文名:(s)-4-(4-氨基苄基)-1,3-噁唑烷-2-酮 分子式:C10H12N2O2 小鼠高迁移率族蛋白(mouse HMGB1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
(S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 中文名:(S)-(+)-4-苄基-3-丙酰-2-恶唑烷酮 分子式:C13H15NO3 小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒
(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO 小鼠总蛋白(TP)ELISA试剂盒
(R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol 中文名: 分子式:C10H12O2 小鼠总胆固醇(TC)ELISA试剂盒
(R)-4-Methoxydalbergione 中文名:(R)-4-甲氧基黄檀醌 分子式:C16H14O3 小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒
小鼠胚胎干细胞;ES-D3(CRL-1934)银线草醇 D HPLC≥98% 5mg 载玻片细胞BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
印度黄酮,优咕吨酮 HPLC≥98% 5mg MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
印楝素 HPLC≥98% 5mg 小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒 ,英文名: CT-1 ELISA Kit
英西卡林 HPLC≥98% 5mg 小鼠肝脂酶(HL)ELISA检测试剂盒Mousehepaticlipase,HLELISAKit 96T/48T
樱花亭 HPLC≥98% 5mg 人花生四烯酸5脂氧合酶(ALOX5/LOG5)试剂盒 Human Arachidonate 5-lipoxygenase,ALOX5/LOG5 ELISA kit
樱黄素 HPLC≥98% 5mg RatC-PeptideELISAKit大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒规格:96T/48T
樱桃甙;洋李甙 HPLC≥98% 5mg 20%Formalin固着液50毫升
幼枝含断氧化马钱子甙 HPLC≥98% 10mg MouseCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISA试剂盒小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羽扇豆鹼 HPLC≥98% 5mg 小鼠心肌营养素1(CT1)ELISA试剂盒 ,英文名: CT1 ELISA Kit
羽扇豆异黄酮 HPLC≥98% 5mg 兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA检测试剂盒rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验一、细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1.表达绿色荧光蛋白(EGFP)的B5-ES细胞。由DrNgy的实室制备。2.D3-ATCC;CRL-1934我们得到时大约传了17代。3.J1-由DrJenish的实室友情提供。我们得到时大约传了7-9代。4.J1rtTA-rtTA表达J1细胞,由DrJenish的实室友情提供。5.表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞,由DrNgy的实室提供。二、一般培养--维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO(白血病抑制因子)的高糖培养基来阻止细胞
传统 ES 打靶 VS TurboKnockout® 基因敲除
上个世纪 80 年代,随着基因重组技术的不断完善和小鼠胚胎干细胞(ES)体外培养技术的成熟,基于同源重组的 ES 打靶得以建立。ES 打靶基因敲除技术修饰准确、效果稳定、成功率极高,一直被认为是对模式动物进行特定基因修饰的金标准。但由于嵌合体阳性率低,且必须与工具鼠交配才能获得删除 Neo 的杂合子,使得构建周期长达 12-16 个月。20 世纪初,核酸酶基因编辑技术(TALEN、CRISPR/Cas9)出现,其周期短(6~8 个月)、无物种限制等优势迅速受到广大科研学者的青睐。但由于脱靶
ES-D3 CRL-1934 小鼠 多能胚胎干细胞 胚胎型 DMEM+ 15% FBS F9 CRL-1720 小鼠 睾丸畸胎癌 胚胎型至内胚层 DMEM, 15% FBS GH1 CCL-82 大鼠 垂体肿瘤 上皮细胞、贴壁 F-12, 15% HS和2.5% FBS GH3 CCL-82.1 大鼠 垂体肿瘤 上皮细胞、贴壁 F-12, 15% HS和2.5% FBS H9 HTB-176 人 T细胞淋巴瘤 成淋巴细胞、悬浮 RPMI-1640, 10% FBS H9/HTLV
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