Disintegrin and metalloprotein

Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9 ELISA Kit成分
1.包被了抗体的包被板，96孔
2.缓冲液，12ml
3.参考用标准品，0;2.5;5;15;30;100ng/ml，待用
4.酶标物，12ml
5.TMB底物液，12ml
6.终止液，12ml
7.洗涤缓冲浓缩液，15ml，50X

实验步骤
将所需数目的板条置于板架上。
将标准品、样品和质控品分别25ml加入到相应的微孔中。
在每一微孔中加入100ml酶联物试剂，混匀5秒 室温下孵育45min 倒去孵育液 用洗涤缓冲液洗板5次，吸水纸上拍干 每孔加100ul的TMB底物液，混匀15秒 室温孵育15min 每孔加入100ul终止液 混匀30秒，确保蓝色完全转变为黄色 15min内450nm处读数
应用范围：
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研究抗酶抗体的合成。
3、显现微量的免疫沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
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ADRA1A(Mouse adrenergic alpha-1A receptor) ELISA 产品特点：
即用型：无需混合，方便快捷，减少误差 灵敏度高：不低于A、B液
稳定性好：2-8℃保存，有效期不低于36个月；显色终止后读数稳定
背景低：底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04
质量可靠：产品批间差异小
外观：本试剂一般情况下为无色，有时略显浅蓝色或浅黄色
使用方法：
用适当的干净容器（用纯净水反复冲洗），倒出适量的单组分TMB显色液，待达到室温后即可使用。
加液：加完HRP结合物并孵育一定时间后，用适当洗涤液洗板3-5次，每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。
终止：加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数：终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。 注意：如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。