Alpha-1-acid glycoprotein 2 EL

Alpha-1-acid glycoprotein 2 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

PLK1  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体     0.1ml
Phospho-PLK1(Thr210)  磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体     0.1ml
Phospho-PLK1 (Ser137)  磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体     0.1ml
Phospho-PLK1(Ser482+Ser486+Ser490)  磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体     0.1ml
PML/TRIM19  早幼粒细胞白血病蛋白抗体     0.2ml
PMP22  外周髓鞘蛋白-22抗体     0.1ml
PMS2  肿瘤错配修复基因PMS2抗体     0.1ml
PNAT/NAT2  N-乙酰基转移酶2抗体     0.1ml
PNK1/PNKP  多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体     0.2ml
Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118)  磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体     0.1ml
PNMT  苯甲基转移酶抗体     0.2ml
PNPO  磷酸吡哆醇氧化酶抗体     0.2ml
Podoplanin Protein/gp36  平足蛋白抗体(淋巴管内皮细胞蛋白)     0.1ml
Pokemon  扑克蒙蛋白抗体     0.1ml
Polycystin 1  多囊肾蛋白1抗体     0.2ml
Polycystin 2  多囊肾蛋白2抗体     0.2ml
PON1  芳香酯酶1(酶)抗体     0.1ml
PP-1B  蛋白磷酸酯酶-1B抗体     0.1ml
PP1A/PP2CA/PPP1CA  蛋白磷酸酶2Cα抗体     0.2ml
phospho-PP1A/PP2CA (Thr320)  磷酸化蛋白磷酸酶2Cα抗体     0.1ml
PP1C gamma  蛋白磷酸酶γ1抗体     0.1ml
PP2A alpha/beta  蛋白质磷酸酶-2A抗体     0.1ml
PP2CA/PPM1A  蛋白磷酸酶2C亚型α抗体     0.1ml
phospho-PPM1A(Ser375)  磷酸化蛋白磷酸酶2C亚型α抗体     0.1ml
PP2Ac/PP4C  磷酸酯酶-2Ac抗体     0.1ml
PPAR-delta/beta  D型-过氧化酶活化增生受体抗体     0.1ml
PPAR alpha  α型-过氧化酶活化增生受体抗体     0.1ml
phospho-PPAR alpha(Ser12)  磷酸化α型-过氧化酶活化增生受体抗体     0.1ml
PPAR gamma  过氧化酶活化增生受体γ抗体     0.2ml
Phospho-PPAR Gamma (ser112)  磷酸化过氧化酶活化增生受体γ抗体     0.1ml
Alpha-1-acid glycoprotein 2 ELISA KitPPIA/Cyclophilin A  亲环蛋白（亲环素）PPIA抗体     0.1ml
PPIB/Cyclophilin B  亲环蛋白（亲环素）PPIB抗体     0.2ml
PPIG  亲环蛋白（亲环素）PPIG抗体     0.2ml
Phospho-PPIG (Ser376)  磷酸化亲环蛋白（亲环素）PPIG抗体     0.2ml
PPIL1  亲环素相关蛋白1抗体     0.2ml
AKT/PKB  蛋白激酶B     0.1ml
phospho-AKT/PKB(Ser473)  磷酸化蛋白激酶B抗体     0.1ml
phospho-Akt(Thr308)  磷酸化蛋白激酶B抗体     0.1ml
phospho-AKT1/AKT2(Thr308+Thr309)  磷酸化蛋白激酶B抗体     0.1ml
phospho-AKT1(Ser129)  磷酸化蛋白激酶B抗体     0.1ml
phospho-Akt(Thr450)  磷酸化蛋白激酶B抗体     0.1ml
Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)  磷酸化组蛋白去乙酰化酶4/5/7抗体     0.1ml
Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486)  磷酸化组蛋白去乙酰化酶4/5/7抗体     0.1ml
hnRNP K  异质核糖核蛋白K抗体     0.2ml
phospho-AKT1(Thr34)  磷酸化蛋白激酶B抗体     0.1ml
 样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。