Basal cell adhesion molecule E

Basal cell adhesion molecule ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

Cox A16 polymerase3D    柯萨奇病毒A16型聚合酶3D
CNTF    睫状神经营养因子抗体
CK16    细胞角蛋白16抗体
C4orf17     4号染色体开放阅读框17抗体
CYFIP2    细胞质脆性X智力低下蛋白结合蛋白2抗体
CRLF2    胸腺基质淋巴细胞生成素受体抗体
CK12    细胞角蛋白12抗体
Ceramide glucosyltransferase     谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体
CXCR3    细胞表面趋化因子受体3抗体
Complement C2    补体C2抗体
CD133    造血干细胞抗原CD133抗体
CD14    内毒素受体抗体
CD20    CD20抗体
CD24    CD24抗体
IL2RA    白介素2受体a链/IL-2RA抗体
CD272    B和T淋巴细胞衰减蛋白抗体
CD4    CD4抗体
CD44    CD44抗体
CD45    白细胞共同抗原抗体
CD5    CD5抗体
ICAM1    细胞间粘附分子-1抗体
CD56    神经细胞粘附分子1抗体
CD62L    L选择素抗体
CD68    CD68抗体
C6orf226     6号染色体开放阅读框226抗体
connexin 30    间隙连接蛋白30抗体
C2orf69    2号染色体开放阅读框69抗体
C3orf18    3号染色体开放阅读框18抗体
CCL4    巨噬细胞炎症因子1β /MIP-1β抗体
CD147    细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体
CD11b    整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体
CD31    血小板内皮细胞黏附分子-1抗体
CD31    血小板内皮细胞黏附分子1抗体
CD34    CD34抗体
CD36    CD36抗体
CARD6    凋亡加强结构域蛋白6抗体
CARD17    凋亡加强结构域蛋白17抗体
CARD4    凋亡加强结构域蛋白4抗体
C4orf34     4号染色体开放阅读框34抗体
CKI gamma 3    酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗体
CARD9    凋亡加强结构域蛋白9抗体
Cholesterol Oxidase    胆固醇氧化酶抗体
Caspase 14    半胱胺酸蛋白酶蛋白14抗体
Caspase 5    半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗体
CSFV    猪瘟病毒抗体
CSFV    猪瘟病毒抗体
Chromogranin C/Sg II    嗜铬粒蛋白C抗体
CHRNA10    型乙酰胆碱受体α10/AChRα10抗体
CHRNA6    型乙酰胆碱受体α6/AChRα6抗体
CHRNA9    型乙酰胆碱受体α9/AChRα9抗体
CHRND    型乙酰胆碱受体δ/AChRδ抗体

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

Basal cell adhesion molecule ELISA Kit实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。