人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：
 

产品名称	人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X16823

细胞名称    人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  1981年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离建株。 超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构 细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。 不表达SP-B和SP-C。 他们在软琼脂中的克隆形成效率为0.83%。
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(121+5)
冻存条件  完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性　
STR  Amelogenin:X,Y；CSF1PO:11，12；D13S317:8，12；D16S539:12，13；D18S51:14；D19S433:13，14；D21S11:28，30；D2S1338:17，23；D3S1358:14，18；D5S818:10,12；D7S820:10，11；D8S1179:13，14；FGA:20,21；TH01:6；TPOX:8，9；vWA:17
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
通关藤苷X HPLC≥98% 20mg MouselymphocytefactorELISA试剂盒小鼠细胞因子ELISA试剂盒规格：96T/48T
卡瓦黄素内酯B HPLC≥97% 20mg Mouselymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISA试剂盒小鼠细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒规格：96T/48T
连翘酯苷I HPLC≥98% 5mg Mouselymphotactin,Lptn/LTNELISA试剂盒小鼠细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
连翘酯苷H HPLC≥98% 5mg MouseLysozyme,LZMELISA试剂盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
连翘酯苷F HPLC≥98% 5mg MouseLysozyme,LZMELISA试剂盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
甲基基苦参醇C HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA试剂盒小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苦参醇X HPLC≥98% 5mg MouseMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA试剂盒小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苦参醇W HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苦参醇N HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageInflammatoryProtein1δ,MIP-1δELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苦参醇S HPLC≥98% 5mg MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒     2-Hydroxyquinoxaline  1196-57-2  中文名：  分子式：C8H6N2O 
人周期素依赖性激酶2elisa试剂盒   人周期素依赖性激酶2试剂盒   规格型号：96T/48T   人周期素依赖性激酶2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人周期素依赖性激酶2试剂盒、人周期素依赖性激酶2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Hydroxyquinoxaline  中文名：  分子式：C8H6N2O  度：98.0%
人周期素依赖性激酶2(CDK2)酶联吸附测定试剂盒   Human CDK2 (Cyclin Depende Kinase 2) ELISA Kit  2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  17241-40-6  中文名：  分子式：C15H10O3 
人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒     2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  中文名：  分子式：C15H10O3  度：%
人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISAKit     2-Methoxystypandrone  85122-21-0  中文名：  分子式：C14H12O5
3-Amino-3-phenyl-1-propanol  1 4593-04-5   中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO    FDA水解酶试剂盒   可见分光光度法   50管/24样
DL-2-Amino-n-octanoic acid  644-90-6  中文名：DL-2-氨基正辛酸  分子式：C8H17NO2    土壤酸性蛋白酶试剂盒   可见分光光度法   50管/24样
Amoxapine  14028-44-5  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O    土壤漆酶测试盒   可见分光光度法   50管/48样           
6-Aminoquinoxaline  6298-37-9  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3    突触核蛋白   英文名称：   Human α Synucleinα   规格：   48T/96T   英文缩写：   α-SYN
6-Aminonicotinic acid  3167-49-5  中文名：6-氨基烟酸  分子式：C6H6N2O2    血清铁蛋白   英文名称：   ferritin in serum   规格：   48T/96T   英文缩写：   SF
人非小细胞肺癌细胞；NCI-H3581,3-二氨基胍盐酸盐   1,3-Diaminoguanidine Monohydrochloride  质量规格：>98% 大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA检测试剂盒Ratcatecholamine,CAELISAKit 96T/48T
3,5-二-L-甲状腺素,3,5-二甲腺原氨酸  3,5-diiodo-L-thyronine  质量规格：>99%,BR 人补体片断4b(C4b)试剂盒 Human Compleme fragme 4b,C4b ELISA Kit
短叶松素(标准品)  Pinobanksin  质量规格：HPLC≥98%,标准品 RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T
环孢素D   Cyclosporin D  质量规格：>95% M.gasiRFLP基因分析试剂盒20
帕比司他  Panobinostat (LBH589, NVP-LBH589)  质量规格：>98%,广谱HDAC抑制剂 PorcineBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISA试剂盒猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HDAC靶点抑制剂  CUDC-101  质量规格：>98% 小鼠肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA试剂盒 ，英文名： cTnⅠ ELISA Kit
盐酸洛美利嗪  Lomerizine hydrochloride  质量规格：>98%,BR 大鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISA检测试剂盒Ratthyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 96T/48T
酯蟾毒配基；蟾力苏(标准品)  Resibufogenin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人补体片断3b(C3b)试剂盒 Human Compleme fragme 3b,C3b ELISA Kit
蒲公英甾醇(标准品)   Taraxasterol  质量规格：HPLC≥98%，标准品 RatTissuefactor,TFELISAKit大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
TAK875  TAK-875  质量规格：>98%,GPR40激动剂 M.inacellulareRFLP基因分析试剂盒20
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。