Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；MCF7-Cas9-544

注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
订购信息：
 

产品名称	Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；MCF7-Cas9-544
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X16657

细胞名称    Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；MCF7-Cas9-544
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长　
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7细胞稳定表达Cas9-Flag-Puromycin，经2ug/ml嘌呤霉素筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；2ug/ml Puromycin　
传代方法  1:3~1:6传代；每周2~3次。　
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测 培养法（-）　
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：18,20；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：14,14；D19S433：13,14；D21S11：30,30；D2S1338：21,23；D3S1358：16,16；D5S818：11,12；D6S1043：12,18；D7S820：8,9；D8S1179：10,14；FGA：23,25；Penta E：7,12；TH01：6,6；TPOX：9,12；vWA：14,15
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
 

 
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
乙酰基beta咔啉 HPLC≥95% 20mg RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISA试剂盒大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乙氧基羰基beta咔啉 HPLC≥95% 20mg RatCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
羟基甲氧基铁屎米酮 HPLC≥95% 20mg RatCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISA试剂盒大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
羟基铁屎米酮 HPLC≥95% 20mg Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
羟基铁屎米酮 HPLC≥95% 20mg Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA试剂盒大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
,二甲氧基铁屎米酮 HPLC≥95% 20mg Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA试剂盒大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
,二甲氧基铁屎米酮 HPLC≥95% 20mg RatCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit大鼠环0酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
氯化天竺葵素O芸香糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISA试剂盒大鼠环0酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
氯化失车菊素O芸香糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCyclin-D1ELISAKit大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
氯化飞燕草素O芸香糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCyclin-D1ELISA试剂盒大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Topiramate  97240-79-4  中文名：托吡酯  分子式：C12H21NO8S    细菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量检测试剂盒20次
Olanzapine  13 2539-06-1   中文名：奥氮平  分子式：C17H20N4S    RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit兔内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Edaravone  89-25-8  中文名：依达拉奉  分子式：C10H10N2O    豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Tazobactam acid  8 9786-04-9   中文名：他唑巴坦酸  分子式：C10H12N4O5S    Rat vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 大鼠内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
Chloramphenicol  56-75-7  中文名：氯霉素  分子式：C11H12Cl2N2O5    HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
1-Indanamine hydrochloride  32457-23-1  中文名：  分子式：C9H12ClN    Humanplasminogenactivator，PLGAELISAKit人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Rasagiline mesylate  161735-79-1  中文名：甲磺酸雷沙吉兰  分子式：3S    兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
4-Amino-3,5-dichloropyridine  22889-78-7  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2    Rat angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 大鼠生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒
Roflumilast  162401-32-3  中文名：罗氟司特  分子式：C17H14Cl2F2N2O3    Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Diethyl 2-acetamido-2-phenethylmalonate  5463-92-3  中文名：  分子式：C17H23NO5    HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISA试剂盒人细胞相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞；MCF7-Cas9-544肯特肽抗体  Anti-Kentsin  质量规格：>95%,BR PorcinesolubleE-selectin,sE-selectinELISA试剂盒猪可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒规格：96T/48T
心房利钠肽（1-28）,大鼠  Atrial Natriuretic Peptide (1-28),rat  质量规格：>95%,BR 小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA 试剂盒
心房利钠肽（126-149）  Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat)  质量规格：>95%,BR Rat endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒
心房利钠肽（126-150），大鼠  Atrial Natriuretic Peptide (126-150) (rat)  质量规格：>95%,BR Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 人纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
心钠素Ⅰ，大鼠  Atriopeptin I (rat)  质量规格：>95%,BR HumanapoproteinA1,apo-A1ELISA试剂盒人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
心钠素Ⅱ，大鼠，小鼠，兔  Atriopeptin II (rat, rabbit,mouse)  质量规格：>95%,BR 植物叶绿体外膜功能检测试剂盒20
心钠素Ⅲ，大鼠  Atriopeptin III (rat)  质量规格：>95%,BR HumaNFrelatedactivationinducedcytokine,ANCEELISAKit人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(ANCE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
带3蛋白质（547-553），人  Band 3 Protein (547-553)(human)  质量规格：>95%,BR 小鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 ，英文名： sPLA2 ELISA Kit
带3蛋白质（824-829），人  Band 3 Protein (824-829)(human)  质量规格：>95%,BR 大鼠铁蛋白(FE)ELISA检测试剂盒Ratferritin,FEELISAKit 96T/48T
碱性成纤维生长因子  bFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin  质量规格：>95%,BR 人白介素23A(IL-23A)试剂盒 Human IL-23A Elisa kit