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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-555
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
23
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
低温冷藏
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
株
细胞名称 Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-555品牌
形态特性 上皮样;多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
传代方法 1:2~1:4传代;每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:22,22;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:11,16;D21S11:28,28;D2S1338:23,24;D3S1358:17,17;D5S818:11,13;D6S1043:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:14,15;FGA:21,21;;Penta E:7,14;TH01:7,8;TPOX:8,11;vWA:15,15;
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-555品牌步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-555品牌注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
2'-DEOXYCYTIDINExy7noCHLORIDE2'-脱氧胞苷超纯级白色结晶粉末RTsigma
6045-52-9雌二醇Estradiol
2-Formylpxenylboronic acid, pinacol ester 380151-85-9
D-纤维二糖八乙酸酯 D-Cellobiose octaacetate,98% 5346-90-7 5G 通用试剂
钛粉/金属钛/海绵钛粉/Titanium 2N,200-300目, 100克 国产
AEBSFAEBSF蛋白组学级白色至米白色结晶COLDsigma
6381-59-5钾钠;洛瑟尔氏盐;四水合钾钠potewwium wo7ium Tartrate (AS)
GENE-PAGEPLUS8% 8% GENE-PAGE PLUS, 7 M 尿素生物技术级透明无色无颗粒液体COLDsigma
乙酸银 Silver acetate,≥99.0% 563-63-3 10G 通用试剂
甘油 Glycqrin;Glycyl clcohol;Trixy7noxy propcnq;Propqnyl clcohol 26-81-2
盐酸吖啶黄,英文名或英文缩写:Acriflavine xy7nochloride,级别:BR,99%,规格:25克
硅酯 H-295NA
环丙扶哌酸,英文名或英文缩写:Ciprofloxacin,级别:BR,20u/mg,规格:25克
日当药黄素 Swertiajaponin (HPLC,≥98%) 6980-25-2 20MG 标准品
醋醋拂轻可的松 Fludrocortisonq ccqtctq 214-36-3
293(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H019人前列腺上皮细胞完全培养基100mL 人内根壳细胞RNAHHIRSC miRNA5 μg
CM-R121大鼠角膜内皮细胞完全培养基100mL
CRP Others Human 人 CRP / C-Reactive Protein 人细胞裂解液 (阳性对照)
PC-3M 1E8细胞,人前列腺癌细胞高转移亚系 大鼠垂体瘤细胞,MMQ细胞 人扁桃体上皮细胞HTEpiC
HHCC(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
雪旺细胞培养基SCM
CL-0151MDA-MB-435S(人导管癌细胞)5×106cells/瓶×2
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL
HCAEC人冠状动脉内皮细胞 HCAEC in human coronary artery endothelial cells ECM(Sicencell Cat#1001)
IL11 Protein Human 重组人 IL11 / Ierleukin 11 / IL-11 蛋白
RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2 Jecket(淋巴瘤细胞)
Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-555品牌SGC-7901, 人胃腺癌细胞系
SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞
SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞
A549, 人肺癌细胞系
购买Cas9稳定表达的人胰腺癌细胞;PANC-1-Cas9-555品牌注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
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近年来,ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术可谓是层出不穷,尤其是CRISPR/Cas9,一出现便在全球范围内掀起一股热潮。同时,各大公司也开发出一系列相应的产品,其中一种至关重要的就是基因敲除阳性克隆筛选的试剂。 目前用的比较多的有CEL I酶,CEL I是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶,活性高,不会产生假阳性。而且CEL I酶是目前生物界发现的唯一能准确切割异源双链DNA中存在错配位点的酶,在遗传学研究和应用领域中扮演重要的角色,多应用在临床诊断领域
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