人胚肾细胞；293 [HEK-293]

订购信息：

产品名称	人胚肾细胞；293 [HEK-293]
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X6321

细胞名称     人胚肾细胞；293 [HEK-293]
形态特性      上皮样
生长特性     贴壁生长　
特征特性      早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。 
培养条件      MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS　
传代方法      1:10~1:20传代，每2~3天换液1次。
传代情况     P20
冻存条件      基础培养基+8%DMSO+20%FBS　
支原体检测     培养法（-）　
STR      Amelogenin：X；CSF1PO：7，12；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：15，18；D21S11：28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11；D8S1179：12，14；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19；
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人生长激素释放肽（Ghrelin）    Human Ghrelin ELISA Kit    96T/48T
人谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）    Human GSH－PX ELISA Kit    96T/48T
人同型半胱氨（HCY）    Human HCY ELISA Kit    96T/48T
人脂多糖结合蛋白（LBP）    Human LBP ELISA Kit    96T/48T
人脂多糖（LPS）    Human LPS ELISA Kit    96T/48T
人髓样分化蛋白－2（MD2）    Human MD2 ELISA Kit    96T/48T
人α1微球蛋白（MGα1）    Human MGα1 ELISA Kit    96T/48T
人β2微球蛋白（MGβ2）    Human MGβ2 ELISA Kit    96T/48T
(NO)ELISA    Human NO ELISA Kit    96T/48T
人NF-kB    Human NF-kB ELISA Kit    96T/48T
人晚期氧化蛋白(AOPP)    Human AOPP ELISA Kit    96T/48T
人不对称二甲基精氨酸（ADMA）    Human ADMA  ELISA Kit    96T/48T
人BTC    Human Betacellulin ELISA Kit    96T/48T
人脑源性神经营养因子（BDNF）ELISA Kit    Human Brain derived neurotrophic facor ELISA Kit    96T/48T
人血管生成素-2(ANG-2)    Human Angiopoietin-2 ELISA Kit    96T/48T
人血管生成素-1(ANG-1)    Human Angiopoietin-1 ELISA Kit    96T/48T
人血管生长素（Angiogenin）    Human Angiogenin ELISA Kit    96T/48T
人角化细胞内分泌因子(AR)    Human Amphiregulin ELISA Kit    96T/48T
人血管紧张素II(ANG II)    Human angiotension II ELISA Kit    96T/48T
人血管紧张素I转化酶(ACE)    Human Angiotensin I converting enzyme ELISA Kit    96T/48T
人环-磷酸腺苷(cAMP)    Human cAMP Elisa Kit    96T/48T
人白细胞活化黏附因子(ALCAM)    Human ALCAM Elisa Kit    96T/48T
TASK 3/KCNK9  酸敏感性钾离子通道蛋白抗体     0.2ml
TSLP  胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体     0.1ml
Myosin-XVIIIb  肌球蛋白XVIIIb抗体     0.2ml
RBPJK/RBP-J  Notch转录调控蛋白RBPJK抗体     0.2ml
Maltose Binding Protein/MBP  麦芽糖结合蛋白抗体     0.2ml
HPV33 E6  人类乳头状瘤病毒33抗体     0.2ml
HPV33 E7  人类乳头状瘤病毒33抗体     0.2ml
人胚肾细胞；293 [HEK-293]PHGDH  磷酸甘油酸脱氢酶抗体     0.2ml
PASK/STK39  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体     0.2ml
HES1  转录因子HES-1抗体     0.2ml
Factor VIII  第八因子抗体     0.1ml
Noggin  指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体     0.2ml
GGT1/CD224  γ谷氨酰转移酶抗体     0.1ml
TAGL2/TAGLN2  细胞骨架相关蛋白2抗体     0.2ml
Peroxiredoxin 2/PRXII  硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ/巯基抗氧化蛋白抗体     0.1ml
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。