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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人正常乳腺上皮细胞;MCF 10A
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
20
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
人正常乳腺上皮细胞;MCF 10A
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 人正常乳腺上皮细胞;MCF 10A |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X6361 |
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况97
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:TEK, CD202B, TIE-2, TIE2, VMCM, VMCM1 Human ANG-R-Tie2(Angiopoietin Receptor Tie2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组ANG-R-Tie2浓度
人干细胞因子(SCF)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:KITLG, FPH2, KL-1, Kitl, MGF, SF, SHEP7 Human SCF(Stem Cell Factor) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组SCF浓度
人细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN/CD147)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:BSG, 5F7, CD147, EMMPRIN, M6, OK, TCSF, basigin (Ok blood group), EMPRIN Human EMMPRIN/CD147(Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组EMMPRIN/CD147浓度
人白介素1受体拮抗剂(IL-1ra/IL-1F3)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IL1RN, DIRA, ICIL-1RA, IL-1RN, IL-1RA, IL-1ra3, IL1F3, IL1RA, IRAP, MVCD4 Human IL-1ra/IL-1F3(Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-1ra/IL-1F3浓度
人血管内皮生长因子受体1(VEGFR1/FLT1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:FLT, FLT-1, VEGFR-1, Fms-related tyrosine kinase 1 Human VEGFR1/FLT1(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组VEGFR1/FLT1浓度
人维生素D受体(VDR)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:VDR, vitamin D receptor, NR1I1,nuclear receptor subfamily 1, group I, member 1 Human VDR(Vitamin D Receptor) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组VDR浓度
玉米赤霉醇残留检测试纸条Candesartan1394819坎地沙坦
氟尼辛葡胺残留检测试纸条Candesartan methyl ester1394819
美洛昔康残留检测试纸条Candesartan ethyl ester1394818
泰乐菌素和替米考星残留检测试纸条Candesartan cilexetil147坎地沙坦西来替昔酯
阿苯达唑残留检测试纸条Campsiketalin936756
人正常乳腺上皮细胞;MCF 10A大肠杆菌致贺毒素黏附抹平因子(Eae)/溶血素(Hly)双重荧光PCR检测试剂盒483-Acetyl,5-dichlorothiophene3615
霍乱弧菌霍乱毒素基因(ctxA)/毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)双重荧光PCR检测试剂盒484-Hydroxy-(3-methoxypropyl),4-dihydroH-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-sulfonamide 1,1-dioxide1541272
副溶血性弧菌TDH/TLH/TOXR/TRH四重荧光PCR检测试剂盒48Boc-Phenylisoserine1455142
脑膜炎奈瑟菌单重荧光PCR检测试剂盒483-tert-Butoxycarbony-(4-anisyl)-phenyl-oxazolidinecarboxylic acid19645
猪链球菌单重荧光PCR检测试剂盒48N-Benzoyl-(2R,3S)-phenylisoserine13213
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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文献和实验问题:我们口服固体制剂车间现场监测干燥效果是使用上海天平仪器厂的快速水分测定仪SH10A,因仪器很老,使用说明书已经找不到了。我们在实际使用中发现其测量结果与按照正规干燥失重所得结果相差较大,但不知道该怎样校准。这里向大家求助,说说你们使用的情况,谢谢!回答:kkatang:快速水分测定仪SH10A我这里也用。对仪器本身的校验,可以采用: 1.对你所用的砝码进行校准,保证砝码的准确。 2.放10g的砝码,看看光标的刻度;然后你可以放置几个共计10g的砝码(相当于你烘干的药品),最好
MCF―10A、HBLl00、MCF―7和MDA―MB―231中,14―3―3σ基因CpG岛是非甲基化的,而在Hs578t和MDA―MB―435中却是完全甲基化的。体外实验表明,用5―氮杂―2―脱氧胞苷处理14―3―3。基因失活的细胞可恢复其表达,这更进一步说明14―3―3σ基因表达沉默与其CpG岛甲基化密切相关。此外,6个正常乳腺上皮活检标本都未发生甲基化,而32例乳腺癌的活检标本14―3―3σ基因都发生甲基化。这些研究结果表明,乳腺癌中14―3―3σ基因的表达缺失与甲基化密切相关。
Nature 深度剖析:管坤良与 Alj 组研究成果为何截然相反,Hippo 通路调控乳腺癌的两面性
1/2,可能会造成不同实验结果。作者猜测,敲除 LATS1/2 带来的 YAP/TAZ 异常持续活化可能对细胞状态有较大的改变,从而使细胞启动某些不为人知的代偿通路以维持稳态,从而改变了 Hippo 通路对 ERα 的调控模式。此外,在 LATS1/2 过表达实验中,Alj 组使用的是瞬间转染,而管组使用的是稳定转染,作者认为这或许会带来一定差异。 2. 其次,双方使用的细胞培养条件有部分不同。Bentires-Alj 组使用的是 M5 培养基培养 PHBECs 和 MCF10A 细胞,鉴于这一培
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