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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存:
17
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁
- 英文名:
MCF10A
中文名称:人正常乳腺上皮细胞
简称:MCF10A
细胞培养条件:DMEM/F12(1:1) 培养基+马血清(5%)+胰岛素(10ug/ml)+表皮生长因子(20ng/ml)+霍乱毒素(100ng/ml)+氢化可的松(0.5ug/ml)
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:上皮细胞样
来源: ATCC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:该细胞是一株不致瘤的上皮细胞株,对唾液酸蛋白,细胞角蛋白及乳脂肪球抗原阳性。细胞在胶原中三维生长,并形成圆顶状的汇合细胞。
本产品仅供科研!
MCF10A人正常乳腺上皮细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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- 内容
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文献和实验MCF―10A、HBLl00、MCF―7和MDA―MB―231中,14―3―3σ基因CpG岛是非甲基化的,而在Hs578t和MDA―MB―435中却是完全甲基化的。体外实验表明,用5―氮杂―2―脱氧胞苷处理14―3―3。基因失活的细胞可恢复其表达,这更进一步说明14―3―3σ基因表达沉默与其CpG岛甲基化密切相关。此外,6个正常乳腺上皮活检标本都未发生甲基化,而32例乳腺癌的活检标本14―3―3σ基因都发生甲基化。这些研究结果表明,乳腺癌中14―3―3σ基因的表达缺失与甲基化密切相关。
Nature 深度剖析:管坤良与 Alj 组研究成果为何截然相反,Hippo 通路调控乳腺癌的两面性
1/2,可能会造成不同实验结果。作者猜测,敲除 LATS1/2 带来的 YAP/TAZ 异常持续活化可能对细胞状态有较大的改变,从而使细胞启动某些不为人知的代偿通路以维持稳态,从而改变了 Hippo 通路对 ERα 的调控模式。此外,在 LATS1/2 过表达实验中,Alj 组使用的是瞬间转染,而管组使用的是稳定转染,作者认为这或许会带来一定差异。 2. 其次,双方使用的细胞培养条件有部分不同。Bentires-Alj 组使用的是 M5 培养基培养 PHBECs 和 MCF10A 细胞,鉴于这一培
breast epithelial MCF-10A cells. 科学问题:双酚 S (BPS) 与双酚 A (BPA) 具有相似的雌激素效应。考虑到 BPS 的内分泌干扰效应,本研究采用基于质谱的代谢组学和定量蛋白质组学方法,研究了 BPS 对正常人乳腺上皮细胞株 MCF-10A 的影响。 研究内容 表型实验:暴露于 BPS 达 24 小时后,MCF-10A 细胞的增殖以一种刺激的方式发生改变,在剂量为 1μM 时增殖率最高。 蛋白质组分析:总共有 200 种蛋白质被鉴定为在暴露于 BPS
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