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- AAT Bioquest
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- AAT-B36315
- 2026年03月16日
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齐一生物
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10 Plates
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文献和实验Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂，可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化，Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯，成为脂溶的Fluo-3留在细胞内，当Fluo-3与细胞内游离钙结合后，其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上，当用480nm波长激发时，其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下：1、钙荧光探针负载；取细胞悬液，加Fluo-3-Am至10μmol/L，置二氧化碳培养箱中孵育1h，其间轻微振荡3次。离心，去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
求助者：wjg200022 最近我在测细胞内的钙浓度，用的是fluo-3 探针，但选多大的激发，发射波长很为难，有文献用的是488/515nm，有的用的506/526nm，我打算用流式细胞仪测，有做过这方面的给点指点，谢谢。 此外我找到一段原话：“Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞
图像，而且细胞检测后就废了。 显微镜观察的话，用一些钙染料应该也可以吧，有一些荧光显微镜操作平台是可以保温操作的（比如一些做胚胎注射的），加一个保温hood，开上每隔10s的连拍，就可以去happy了。 关键看你要做什么，极端点的话开37度的空调，用37度的水浴回流都可以啊. wori1123 DarrenWONG wrote: 您要观察多久？几分钟？几小时？ 用Fluo
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