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Stayright Purpl
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12个月
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DAB作为最常用的IHC色原已经应用了数十年,因为它便宜且对常规应用敏感。但是,已证明DAB具有诱变性,并且对实验室工作人员和环境有害。为了解决此问题,AAT提供的Stayright Purple是比DAB更安全的IHC色原。此外,Stayright Purple提供了一种快速简便的方法,可在HRP存在的情况下以DAB的高灵敏度产生干净而强烈的紫色荧光。 Stayright Purple HRP底物还显示出非诱变作用,细胞毒性最小。 ReadiUse Stayright 紫色过氧化物酶(HRP)底物适用于基于过氧化物酶(HRP)的免疫组织化学(IHC)和原位杂交(ISH)染色方法。在HRP诱导的氧化作用下,Stayright Purple在测定的目标部位形成紫色不溶性沉淀产物。最终的紫色物质不溶于有机溶剂和有机固定介质,因此可以通过常规的脱水和盖玻片步骤保持明显的紫色染料。为了提高便利性,您可以尝试使用我们的ReadiUse Stayright 紫色过氧化物酶(HRP)底物(#45900和45901)。它是一种稳定的,含有过氧化氢的预混合溶液,因此无需任何混合步骤,即可使用。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Stayright Purple IHC显色底物。
样品实验方案
简要概述
溶液配制
工作溶液配制
每1 mL Stayright Purple HRP缓冲液(组分B)中加入10μL100X Stayright Purple(组分A)和1μL稳定的3%过氧化氢(组分C)。
注意:未使用的预混合工作溶液可以在2-4℃下保存数周,以备将来使用。 但是,我们建议根据需要混合这些成分。
实验步骤
1.涂抹Stayright Purple溶液。 在室温下孵育5-15分钟。
2.将载玻片浸入dH2O中以停止颜色显影并检测染色强度。如果染色强度不够明亮,则需要更长的孵育时间。 您可以重新应用Stayright Purple溶液来继续开发。
3.用dH2O洗涤5-10分钟。
4.如果需要,请复染。
5.用乙醇脱水,然后永久固定在有机永久固定介质中。
图示
图1. FFPE肺腺癌组织中EpCAM的免疫组织化学检测。 将组织切片与多HRP共轭的山羊抗兔IgG孵育,然后分别用Stayright Purple(左)和DAB(右)显影。 Stayright Purple产生的深层荧光具有高灵敏度和清晰的分辨率,类似于DAB。
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