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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Proteus mirabilis
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
负20度
- 规格:
50次
Proteus mirabilis
产品及特点
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增变异变形杆菌PCR试剂盒,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 变异变形杆菌PCR试剂盒 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 变异变形杆菌PCR试剂盒 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 变异变形杆菌PCR试剂盒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 变异变形杆菌PCR试剂盒PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(变异变形杆菌PCR试剂盒PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验作者:赵晴 昆明市东川区人民医院检验科 肥达反应(Widal test): 用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原,检测受检血清中有无相应抗体的半定量凝集试验,称肥达反应(Widal test)。本试验与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下,能辅助诊断伤寒、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起的肠热症。 外斐反应(Wiel-Felix): 斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株的菌体抗原(OXk、OX19 、OX2抗原)具有共同的耐热性多糖类属抗原,常用后者代替相应的立克次体抗原进行
的。另外,作为粪便污染的指标细菌还有:分叉杆菌(Bifidobacterium)、拟杆菌(Bacteroides)、乳酸菌、肠杆菌科中的梭状芽胞和底群链球菌等,据报道,拟杆菌是人体肠道内第二个较大的菌群;厌气性乳酸菌占人体肠道内细菌组分的50 %以上,一般粪便中该菌量为109个/g—1010个/g。肠道内属于肠杆菌科的细菌,除上述的细菌外,还有克雷伯氏菌属(Klebsiella)、变形杆菌和副大肠杆菌等,也可以充当粪便污染指标菌。很多研究者认为,在冷踪食品或冷冻状态照射处理过的食品中,大肠杆菌可比其他多种病原
基因组不完整或基因位点改变而不能进行正常增殖的病毒。如丁型肝炎病毒。 4.干扰现象:两种病毒共同感染同一细胞时,可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象,称为病毒的干扰现象。 5.ts突变株:就是温度敏感性突变株。即在28℃~35℃条件下可增殖,而在37℃~40℃条件下则不能增殖。这是因为ts变异的基因所编码的蛋白质或酶在较高温度下失去功能,故病毒不能增殖 6.CPE:病毒在细胞内增殖造成细胞破坏死亡的作用称其为杀细胞效应,这种效应在体外组织培养时可观察到细胞变园
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