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Goldenstar® RT6 cDNA Synthesis Kit
充足
北京擎科生物科技股份有限公司
30次/100次
规格: | 30次 | 产品价格: | ¥525.0 |
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规格: | 100次 | 产品价格: | ¥1500.0 |
组分 | 规格 | |
TSK301S(30 次 ) | TSK301M(100 次 ) | |
Goldenstar® RT6 (200 U/µL) | 30 µL | 100 µL |
5×Goldenstar® Buffer | 150 µL | 500 µL |
DTT(0.2 M) | 40 µL | 120 µL |
dNTP Mix(10 mM) | 40 µL | 120 µL |
Goldenstar® Oligo(dT)17(50 μM) | 40 µL | 120 µL |
Goldenstar® Randomer(50 μM) | 40 µL | 120 µL |
RNase-free Water | 1 mL | 1 mL |
组分 | 使用量 |
5×Goldensta® Buffer | 4 µL |
dNTP Mix | 1 µL |
Goldenstar® Oligo(dT)17 or Randomer* | 1 µL |
DTT | 1 µL |
Goldenstar® RT6 | 1 µL |
RNA Template** | ** |
RNase-free water | Up to 20 µL |
组分 | 使用量 |
逆转录方法 | 优势 | 劣势 |
一步法 |
1. 消除了样品转移步骤,不仅消除了控制物污染的潜在来源,且需较少的准备和操作时间
2. 使用的引物是基因特异性引物,灵敏度高,常用于分析低表达水平基因。
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1. 同一样本中只有有限数量的目的基因被扩增,且需在转录和扩增间寻找一个平衡; 2. 逆转录与扩增同时进行,易产生交叉影响; 3. 模板不易保存,每次实验需重新提取RNA。 |
两步法 |
1. 可将大批量RNA转化为cDNA,然后储存后用于后续实验,检测大量基因;
2. 可使oligo(dT)或随机引物合成第一链cDNA,逆转出所有mRNA信息;
3. 在优化RT和PCR步骤后,可更好地控制实验过程;
4. 只有少量的转录本用于PCR,则从RNA分离到RT反应的抑制剂(乙醇、酚及胍盐等)被稀释降低抑制 |
1. 更耗费时间,且带来污染的可能性更高;
2. RT过程及条件需以相同效率逆转录RNA,否则会影响qPCR的启动效率,带来不同的实验结果。
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