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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
负20度
- 规格:
50次

它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增巴斯德氏杆菌属通用PCR试剂盒,与其他微生物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分
| 成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL(亮黄色) |
| 巴斯德氏杆菌属通用PCR试剂盒PCR引物混合液 | 试剂三 | 100 μL(白盖) |
| 巴斯德氏杆菌属通用PCR试剂盒PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
试剂四 | 50 μL(黄盖) |
| 核酸释放剂(试用装) | 试剂五 | 20 次(1 mL,绿盖) |
| 使用手册 | 试剂六 | 1 份 |
自备试剂:样品 DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
| 成分 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 巴斯德氏杆菌属通用PCR试剂盒PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18 μL | -- |
| PCR 阳性对照(巴斯德氏杆菌属通用PCR试剂盒PCR阳性对照的 1000 倍稀释液) |
-- | -- | 18 μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应(35 个循环) | 95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染
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文献和实验RT。二步法荧光定量PCR:小鼠肝脏组织Bioteke 2×SYBR real-time PCR premixture Kit。 T公司荧光定量试剂。20μl反应体系包括:10μl 2×SYBR premixture,8.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA。T公司荧光定量试剂,20μl反应体系包括:10μl 2×T公司荧光定量试剂, 8.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl
的平台期。例如定量试剂中酶的活性,dNTP 用量以及 PCR 产物的抑制等,这里我们就不展开讲解了。 参考文献: Amplification efficiency: linking baseline and bias in the analysis of quantitative PCR data. J. M. Ruijter, C. Ramakers et al. 《荧光定量 PCR 手册》. Applied Biosystems. Real-time PCR: Understanding
本文主要介绍 ELISA 试剂盒、实验样本、相关问题,帮助大家更好地开展实验 试剂盒 Q1:科研试剂盒与临床试剂盒的区别 ? A1:临床试剂是经过权威机构认可的,如 FDA、CFDA 等;而科研试剂一般是厂家自主研制,不需要通过权威机构验证。 经营临床诊断类产品的机构需要取得《医疗器械经营企业许可证》;经营科研试剂的机构不需要此证件。 临床试剂盒一般仅用于检测人血清/血浆等较为单一的分泌性样本类型;科研试剂盒的样本检测种类、检测范围则比临床试剂盒宽广得多。但一般来说,临床试剂盒的质量
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