- ￥2490
- 康朗生物
- KL-13-74900
- 中国/上海
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae(R-Kp)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
负20度
- 规格：
50次
Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae(R-Kp)
产品及特点
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） |
50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照（抗碳青霉烯肺炎克雷伯菌PCR阳性对照1000倍稀释液） | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意：
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验等中发现了此类变异的细菌。携带了这一耐药基因的细菌能够产生一种酶，名叫新德里一号金属酶，英文缩写为NDM-1，而它恰恰能水解和破坏大多数抗生素，使之失效。 关注肠杆菌科细菌耐药 既然产NDM-1菌株主要来源于肠杆菌科细菌，顾兵认为，这足以证实了耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌已成为一个全球性问题。 肠杆菌科细菌主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌等，也是引起医院感染最常见的病原菌。 据2009年度卫生部全国细菌耐药监测（Mohnarin）结果，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离率为革兰
类水解能力存在较大差异，一般根据分子结构分为A、B、C、D四大类，其中B类酶在其活性部位结合有锌离子，因此又称为金属β－内酰胺酶。其水解底物包括青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类等，表现为产酶细菌对这些药物广泛耐药。金属β－内酰胺酶首先在铜绿假单胞菌、不动杆菌中发现。近年来，在肠杆科细菌，如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等中也有发现。迄今为止已经确定的金属β－内酰胺酶除NDM－1外，还包括IMP、VIM、GIM、SIM、SPM等型别。 最早报道的产NDM－1细菌为肺炎克雷伯菌，于2008年在一位印度裔
。而且，产生AmpC酶的菌株不被β-内酰胺酶 抑制剂抑制。如果同时拌有孔蛋白基因突变或特定的外排泵的过表达，产AmpC酶菌株还可以耐碳青霉烯类药物。染色体介导的AmpCβ-内酰胺酶主要存在肠杆菌，枸橼酸杆菌，沙雷和其他一些革兰阴性细菌中，通常表达水平低，但可被青霉素类，碳青霉烯类，和一些头孢类如头孢西丁诱导高水平表达。III和IV代头孢菌素不诱导AmpC酶，但他们可以被水解；质粒介导的AmpC酶可以在细菌之间传播，主要存在于临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠杆菌中。目前CLSI还没有确认的AmpC酶表型确证试验
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