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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 英文名:
Canine Parvo Virus(CPV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
Canine Parvo Virus(CPV)
犬细小病毒(African swine fever, ASF)是由犬细小病毒(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病 死率高达100%,是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病,受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定,对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了ASFV的PCR 检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增犬细小病毒,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 犬细小病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 犬细小病毒 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 犬细小病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 犬细小病毒 PCR 引物混合液 |
各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(犬细小病毒PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验性传染的烈性传染病。临床上以急性出血性肠炎和心肌炎为特征。 【流行病学】犬细小病毒对犬具有高度的接触性传染性,各种年龄的犬均可感染。但以刚断乳至90日龄的犬发病较多,病情也较严重。幼犬有的突然呼吸困难,心力衰竭,短时间内可呈现心肌炎症状而突然死亡。据临床发病犬的种类来看,纯种犬及外来犬比土种犬发病率高。本病一年四季均可发生,但以天气寒冷的冬春季多发。病犬的粪便中含毒量最高。 【诊断】 1、根据临床症状诊断,粪便多为咖啡色及番茄酱色,且带有特殊的腥臭气味。 2、血相变化,红细胞、血色素、比容
法。(3)免疫胶体金技术在犬病毒病诊断中的应用王中力等[18]采用柠檬酸三钠法制备胶体金颗粒,标记纯化的犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)单克隆抗体,在玻璃纤维素膜上喷加纯化的犬细小病毒多克隆抗体,制成诊断CPV抗原的快速诊断试纸条,并应用研制的CPV试纸条对收集到的120份犬粪便样品进行检测,其结果与血凝试验结果相比较,血凝效价在1∶40以上,试纸条均能检测为阳性。该试纸条与犬瘟热病毒及犬传染性肝炎病毒无交叉反应,且试纸条保存6个月后,其检测结果重复性为100%。徐葛林等[19]采用
,如破伤风杆菌,产气荚膜杆菌,炭疽杆菌,鼠疫杆菌等侦检. ⑤需特殊培养的无芽胞厌氧菌,如脆弱类杆菌、艰难杆菌的鉴定等. 某些病原微生物,某些遗传病或癌基因,型别较多,或突变或缺失存在多个好发部位,多重PCR可提高其检出率并同时鉴定其型别及突变等可系统应用的有:乙型肝炎病毒的分型;乳头瘤病毒的分型;单纯疱疹病毒的分型;杜氏肌营养不良症的分型及癌基因的检测等. 多重PCR的特点有: ①高效性,在同一PCR反应管内同时检出多种病原
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