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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 英文名:
Bordetella bronchiseptica
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
支气管败血波氏杆菌PCR试剂盒
Bordetella bronchiseptica
产品及特点 Bordetella bronchiseptica
支气管败血波氏杆菌(African swine fever, ASF)是由支气管败血波氏杆菌(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病 死率高达100%,是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病,受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定,对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了ASFV的PCR 检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增支气管败血波氏杆菌,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 支气管败血波氏杆菌 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 支气管败血波氏杆菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 支气管败血波氏杆菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 支气管败血波氏杆菌 PCR 引物混合液 |
各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(支气管败血波氏杆菌PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验相关实验
(一)波氏杆菌病波氏杆菌病是家兔常见的一种呼吸道传染病。该菌常存在于家兔上呼吸道粘膜上,在气候骤变的秋冬之交极易诱发此病。1、流行特点本病传播广泛,常呈地方性流行,一般慢性多见,急性败血性死亡较少。病原是支气管败血波氏杆菌,简称波氏杆菌。该菌常存在于家兔上呼吸道粘膜上,在气候骤变的秋冬之交极易诱发此病。这主要是由于家兔受到体内、外各种不良因素的刺激,导致抵抗力下降,波氏杆菌得以侵入机体内引起发病。本病主要通过呼吸道传播。带菌兔或病兔的鼻腔分泌物中大量带菌,常可污染饲料、饮水、笼舍和空气
、副百日咳杆菌和支气管败血杆菌。前两种对人致病,后者对动物致病。
火鸡又名七面鸟,是体格最大的家禽之一。因生长快,肉质好,胆固醇低,倍受西方国家人们的有睐。我国于80年代初引进火鸡,先后在北京、天津等地试点推广,随着养禽业的蓬勃发展,火鸡养殖现已发展到20多个省、市,养殖业的成功与发展,取决于科学的饲养管理和完善的防病体系,而对疾病的了解和认识是建立防病体系的依据,为此,对火鸡6种常见传染病及防治作加行浅析:1 新城疫(Newcastle disease)新城疫是主副粘病毒感染禽类而呈毁灭性流行的一种败血性传染病,无疑,一群尚未使用疫苗免疫的火鸡群
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支气管败血波氏杆菌PCR试剂盒
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