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NMab Protein A 亲和层析介质

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  • 苏州
  • 2025年07月15日
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      苏州纳微科技股份有限公司

    ProteinA亲和层析是利用ProteinA配基与目标抗体具有专—结合力作用从而达到分离纯化抗体的目的。ProteinA亲和层析大大简化抗体下游分离纯化工艺,成为抗体分离纯化的标准。目前市场上的ProteinA亲和层析介质主要分为以多糖(琼脂糖、葡聚糖、纤维素)为基质和以合成高分子(聚丙烯酸酯,丙-烯酰胺〉为基质两大类。琼脂糖基质在溶胀状态下具有网状结构,比表面积大,因而亲和截量比较高,但机械强度不高、耐压低。

     

    纳微科技通过长期研发创新开发出世界领先的微球精准制造技术,对微球的材料组成、粒径大小、粒径均匀性、孔径大小及表面性能达到非常精准的调控。纳微凭借这一技术平台最早开发出了单分散ProteinA亲和层析介质UniMab%。 UniMab"是聚丙烯酸酯为基质的填料,具有机械强度高、耐压好、柱床稳定、传质快、非常皮实等特点,因此受到很多抗体客户的欢迎,尤其是在抗体连续流纯化领域。


    随着上游发酵技术的进步,抗体表达量越来越高,下游亲和捕获成为抗体生产瓶颈,因此对下游ProteinA亲和层析介质的载量要求越来越高。为了因应这一需求,纳微科技以琼脂糖为基球,利用特有的微球改性技术以增强其机械强度,并结合自主产权的ProteinA配基技术,成功开发出比UniMab具有更高载量的NMabProteinA 亲和层析介质。除了高截量外,NMab还具有优良的结合特异性、耐碱性以及压力-流速特性,是抗体客户降低单抗纯化成本的良好选择。

     

     

    NMab 高交联琼脂糖为基,利用特有的微球改性技术以增强其机械强度,使得其在载量、流速、耐碱性、配基脱落、HCP残留、纯度、回收率等方面与进口主流产品相当,具有可替代性。


    NMab 具有以下优势

    l载量高:动态载量大于 50 mg/mL
    l耐碱性强:0.5 M NaOH浸泡下24小时载量只下降11%
    l配基脱落低:小于10 ppm
    l宿主蛋白(HCP)残留低:一般在1000 ppm以内
    l回收率高:大于90%
    l纯度高:亲和洗脱液纯度 98% 以上




     

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    • 亲和层析

      亲和层析原理 亲和层析是一种通过生物分子之间的特异性相互作用来分离物质的层析方法,如酶和底物、抗原与抗体等非常专一的相互作用 (图9)。配基被固定在填料上,可以结合相应的生物分子,再采用合适的方法如降低pH值、离子强度等,或添加和配基或者目的分子类似的基团,使目标分子以活性的形式被洗脱。 图9 亲和层析原理   特点 速度快,操作简单,可以快速将目标蛋白与大量杂质进行分离 特异性高,经常一步即可达到大于90%的纯度 配基种类繁多,填料选择性高 (包括纯化标签抗体蛋白、抗体、酶类、DNA结合

    • 亲和层析凝胶指南

      Healthcare Bio-Sciences Corp. 800 Centennial Avenue P.O. Box 1327 Piscataway, NJ 08855-1327 USA GE Healthcare Bio-Sciences KK Sanken Bldg. 3-25-1, Hyakunincho Shinjuku-ku, Tokyo 169-0073 Japan www.gehealthcare.com/protein-purification

    • 亲和层析的应用

      、抗体间亲和力一般比较强,其解离常数为10 8-10? 12M,所以洗脱时是比较困难的,通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、抗体种类或使用类似物等来降低二者的亲和力,以便于洗脱。另外金黄色葡萄球菌蛋白A(Protein A)能够与免疫球蛋白G(Ig G)结合,可以用于分离各种Ig G。2.生物素和亲和素生物素(biotion)和亲和素(avidin)之间具有很强而特异的亲和力,可以用于亲和层析。如用亲和素分离含有生物素的蛋白等。生物素和亲和素的亲和力很强,其解离常数为10 15M

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