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- AAT Bioquest
- 美国
- 17084
- 2025年10月05日
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- 保存条件：
-15℃避光防潮
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24个月
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1
2-Aminoethoxypropargyl ddATP
| 货号 | 17084 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 1 umoles | ||
| Ex (nm) | Em (nm) | ||
| 分子量 | 659.24 | 溶剂 | DMF |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
产品基本信息
货号：17084
产品名称：2-Aminoethoxypropargyl ddATP
规格：1 umoles
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：24个月
产品物理化学光谱特性
分子量：659.24
外观：液体
溶剂：DMF
激发波长(nm)：N/A
发射波长(nm)：N/A
产品介绍
Sanger法是DNA测序中最早最靠谱的方法之一，DNA由四种脱氧核苷酸三磷酸（dNTP）合成。将每个新核苷酸添加到最后的dNTP的3'-OH基团中。可以将二脱氧胸苷三磷酸（ddTTPs）添加到正在生长的DNA链中，但是当它出现时，链延长会停止，因为下一个要连接的核苷酸没有3'-OH。待测序的DNA被制备成单链。该模板DNA带有大量dATP，dGTP，dCTP和dTTP的混合物。加入四种双脱氧核苷酸（ddATP，ddGTP，ddCTP和ddTTP）的混合物，每种混合物均以限量存在，并分别用发不同颜色的荧光的“标签”标记。因为所有四个正常核苷酸都存在，所以链延伸正常进行，直到偶然地DNA聚合酶插入ddNTP（而不是正常dNTP）。如果正常核苷酸与双脱氧形式的比率足够高，则在插入ddNTP之前，某些DNA链将成功添加数百个核苷酸，从而终止该过程。在孵育期结束时，片段的长度从最长到最短分离，一个核苷酸之间的差异足以使该链与下一较短和下一较长链分开。当被激光束照射时，四个DDNTP中的每一个都会发出不同的荧光，可以通过自动扫描仪打印输出序列。这些ddATP，ddGTP，ddCTP和ddTTP胺衍生物是开发Sanger测序试剂的重要组成部分。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的2-Aminoethoxypropargyl ddATP。
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文献和实验DNA测序的方法有很多种。目前最常见的是双脱氧终止法了。在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶。测序时分成四个反应，每个反应除上述成分外分别加入2，3-双脱氧的A，C，G，T核苷三磷酸（称为ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTP），然后进行聚合反应。在第一个反应物中，ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链，由于其3位的羟基变成了氢，所以不能继续延伸。所以第一个反应中所产生的DNA链都是到A就终止了； 同理第二个反应产生的都是以C结尾的； 第三
形成一种全部具有相同的5'-引物端和以ddC残基为3’端结尾的一系列长短不一片段的混合物。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离制得的放射性自显影区带图谱将为新合成的不同长度的DNA链中C的分布提供准确信息，从而将全部C的位置确定下来。类似的方法，在ddATP、ddGTP和ddTTP存在的条件下，可同时制得分别以ddA、ddG和ddT残基为3‘端结尾的三组长短不一的片段。将制得的四组混合物平行地点加在变性聚丙烯酰胺凝胶电泳板上进行电泳，每组制品中的各个组分将按其链长的不同得到分离，制得相应的放射性自显影图谱
本来用来当作dATP的对照 ，ddATP的东东可以强烈地诱导凋亡(当然，大家现在也应该意识到，他纯化的细胞组分里 ，mitochondria是有一点破裂的，不然cytochrome c不会释放出来，凋亡也不可能发生， 这又是一个lucky的东东，呵呵)，所以，后来他们把dATP提高到能诱导凋亡的浓度，这样 ，才有可能做后面的分离纯化。事实上，分离出apoptosome里的几个组分到不需要绝顶高 手，（后面的工作才真正可以体现他lab的超强纯化能力）。从王lab出去的li peng现在s
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