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- 泽叶生物
- ZY-97003
- 中国
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
10×TBST,pH7.4
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
Store at 2-8℃ for one year.
- 规格：
盒
| 60ml | 100.00元 |
| 英文名称 | 10×TBST,pH7.4 |
| 中文名称 | Western 洗涤液(10×) |
| 别 名 | Tween20/TBS solution (10×TBST,pH7.4); WB Washing Buffer, 10×; Western Blot Wash Buffer, 10×; 10×Western Blot Wash Buffer; 10*TBST; |
| 保存条件 | Store at 2-8℃ for one year. |
| 产品介绍 | 简介 WB洗液(Western Blot Wash Buffer)可以用于WB时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可降低背景，增强信噪比。 使用说明： 取适量WB洗涤液，用去离子水10倍稀释。在一抗或二抗孵育结束后，加入10ml的WB洗涤液，使之能盖住蛋白膜，在摇床上缓慢摇动洗涤3-5分钟后，吸尽洗涤液，再加入新的WB洗涤液。共洗涤3次，每次3-5分钟。然后进行后续的操作。如果按照上述洗涤条件,WB的染色结果背景仍然较高，可以适当延长洗涤时间，并增加洗涤次数。通常，延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对WB的结果产生负面影响。 注意事项： 1．WB洗涤液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在2周内用完。 2．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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文献和实验做了很久的 WB（western blot），走了很多弯路，其实发现 WB 想要做好并不难，总结了 WB 实验中可能会遇到的问题，分析了可能的原因及对应的解决方案，希望能成为你实验成功的基石。 问题 1：转膜不充分 (1) 膜没有完全均匀湿透 使用 100% methanol 浸透膜。 (2) 靶蛋白分子量小于 10 000 选择小孔径的膜，缩短转移
1. 溶液准备： 转印缓冲液：0.025M Tris base ， 0.192 M甘氨酸 ， 30%甲醇 10×TBST：250mM Tris-HCl （ pH 8.0 ） ， 1.25M NaCl ， 0.5%Tween20 封闭液：1×TBST ， 3%脱脂奶粉 洗涤液：1×TBST 2. 实验程序： A. 膜的准备： 将PVDF膜切成条浸在甲醇中，室温条件下在摇床上摇1min，去除甲醇后加入1×TBST备用。 B. 膜转印： 1. 细胞或组织裂解液进行SDS
。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色，以观察蛋白的残留情况。 4. 封闭(Blocking)： 转膜完毕后，立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中，漂洗1-2分钟，以洗去膜上的转膜液。吸尽洗涤液，加入Western封闭液，在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。 从转膜完毕后所有的步骤，一定要注意膜的保湿，避免膜的干燥，否则极易产生较高的背景。 对于一些背景较高的抗体，可以4℃封闭过夜。 5. 一抗
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