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上海研谨生物
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六胺银法染色实验服务
服务名称: 六胺银法染色实验服务
规格: 样本
代测周期: 4周
价格: 100元
六胺银法染色实验服务
实验原理:
利用氧化剂氧化细菌和真菌内的细胞壁内的粘多糖等成分而暴露出醛基酸基还原六胺银内的银离子为黑色的金属银而显色。同理,肾小球基膜内含有一些多糖成分, 易于被氧化露出醃基而被染色。
实验步骤:
1、切片经二 甲苯5min*2,无水乙醇5min*2、 95%乙醇6min*2、 85%乙醇5min、 70%乙醇5min完成脱蜡。脱蜡后自来水洗5min。
2、加入1%过碘*酸水溶液中作用10min>自来水洗,然后蒸憶水洗二次,每次3min。
3、六气银液预热至65t,切片放入其中浸染75min蒸馅水洗二次,每次3min。
4、用0.1%氯化金调色处理5min蒸憶水洗二次,每次3min。
5、用5%硫代酸钠处理5min蒸惘水洗二次,每次3min。
6、用0.5%亮绿复 染细胞质。
7、切片再经70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇各Imin:经95%Z醇imin.换液重复-次;无水乙醇2min,换液重复一次快速脱水,后用二甲苯透明5min,换液重复一次。
8、根据盖玻片规格和载玻片上组织多少,滴加适量中性树胶,封片。
操作要求:
1、氧化切片很重要。氧化液种类和浓度、作用时间影响阳性结果的数量。
2、使用的容器应保持清洁,才能保证结果的稳定性。
结果判定:
细菌、真菌的粘多糖成分被染成深黑色,肾小球基膜也被染成深黑色,背景为淡绿色或无色。
[项目开展范围]慢病毒,腺病毒,RNAI类, 分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验,芯片类实验,并为广大客户朋友们提供课题设计指导、基金申请指导、SCI. 核心期刊等服务。
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文献和实验要比IGSS法敏感5~8倍,抗体的稀释度从1: (1000~5000)提高到1: (10000-50000),大大节约了第一抗体。尤其组织细胞内抗原性较弱,抗原丢失严重,应用双PAG法均能得到有效的检测,阳性检测率和阳性强度有了明显的提高。某些抗原用单一的SPA金标探针对某些抗原只能获得低强度的染色,当用双PAG法时可获得强的特异性染色。
说明:这是我今年做免疫组化的一点体会,奉献给大家。如有不正确的地方,敬请指教。同时,这也是我应付《免疫组化》的一份作业,老师给了我85分。斑竹呀,如果觉得有点用,就请鼓励一下,加点分吧!:D:D:D应用SABC法进行免疫组化染色的体会SABC(Strept Actividin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。由于该方法中的链霉亲和素的等电点接近中性(pH=6.0-6.5),对组织和细胞的吸附性特别低,因而具有较低的背景。它的步骤
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