实验耗材离心管2.0EP管无菌无酶微量管

总RNA抽提实验操作攻略和疑问解答

;1.8 。 [实验用品] 【实验耗材】 1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl。酒精擦拭，头部重点，紫外线照射。 2、吸头：1ml、200μl、20μl 3、匀浆管：5ml 4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个 5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶：2个60ml的棕色广口试剂瓶。青霉素小瓶(分装无水乙醇，高压

甲醇酵母表达的试验步骤

态细胞的制备及转化 （1）取10ul TOP10F’菌液，接种于200ml LB液体培养基中活化培养，37℃，200 rpm，16～18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB培养基中。 （2）37℃，200 rpm，培养16～18小时。 （3）灭菌500 ml离心管，4℃，4000 rpm，20 min。得菌体沉淀。弃上清，菌体用10％甘油重悬并洗涤。重复洗涤3次。 （4）第三次离心后，弃绝大部分上清，留下约1ml 液体用于重悬菌体。 （5）从制得得感受态细胞中，取200ul于灭菌EP管中

生物实验室必备技能之一：质粒抽提

，2-3 min低温离心，吸弃液体培养基； 注意：高拷贝的质粒，需要5-15 mL的培养菌液；低拷贝的质粒，则需要15-30 mL的培养菌液；残留的液体培养基过多会影响细菌的裂解效果，应尽可能吸干培养基。 03 向离心管中加入250 μl 溶液Ⅰ（加入RNase A），吹匀菌沉淀并将悬液转移至新1.5 mL EP管中； 注意：菌体悬浮不完全会导致裂解不完全，质粒提取量和纯度会降低。 04 向EP管中加入250 μl 溶液Ⅱ（裂解Buffer），温和翻转EP管6-10