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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pGreen II 0800-miRNA
- 库存:
大量
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
| 别名 | pGreenII 0800-miRNA |
| 启动子 | 35S |
| 复制子 | pSa |
| 原核抗性 | Kan |
| 克隆菌株 | DH5a |
| 培养条件 | LB/37℃ |
| 质粒宿主 | 植物 |
| 质粒用途 | 转录调控 |
| 片段类型 | miRNA |
| 片段物种 | 空载体 |
| 原核抗性 | Kan |
| 荧光标记 | Fluc,Rluc |
| pUC57-M(SARS-CoV-2)质粒 |
| pUC57-ORF8(SARS-CoV-2)质粒 |
| pCDNA3.1-S(SARS-CoV-2)-3×FLAG质粒 |
| pX330-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9-hGem(1/110)质粒 |
| pUC57-E(SARS-CoV-2)质粒 |
| pCS-kI质粒 |
| pEnCMV-TNFRSF19(human)-3×FLAG质粒 |
| hOC-GFPtpz质粒 |
| pBad-EBFP2质粒 |
| pEZT-BM质粒 |
| Flag-SENP1质粒 |
| pFC330质粒 |
| pFLAG-CTS质粒 |
| PVS10质粒 |
| pUC57-CDC-Positive-V2(SARS-CoV-2)质粒 |
| pUC57-ORF3(SARS-CoV-2)质粒 |
质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul ddH2O 溶解质粒,然后转化进相应的感受态中,再挑取单菌落提取质粒(提供图谱 序列 测序报告 售后)暂时不使用可先放置于-20℃保存,TE缓冲液中-80℃的DNA更佳
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文献和实验类似物的瞬时表达方式。miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三种形式。其中pri-miRNA(含侧翼序列)的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构,效果更好,是应用最为广泛的方法。microRNA过表达系统中有CMV启动子(II型启动子)和H1启动子(III型启动子)两种方式供选择。III型启动子(H1、U6等)具有表达效率高、有效的确定终止位置等优点,成为首选。II型启动子适用于pri-miRNA序列中有连续的5个T-导致III
-miRNA来增加或阻断特定miRNA的活性。这种方法便于操控细胞培养中特定miRNA的活性。 载体方法有着长期改变的优势,能够追踪个别细胞。我们利用人工的shRNA质粒或Pol II表达载体,来过表达特定的miRNA。对于miRNA的下调,我们要么表达一个shRNA,它能产生与miRNA前体的茎环结构互补的siRNA,要么使用miRNA海绵(miRNA sponge),它能在特定miRNA的多个目标位点表达报告基因。 Winston Kuo(哈佛大学) 目前有两种通用
因抑制作用。 2 、 DNA 载体 由于在哺乳动物和果蝇中不存在 RNAi 的扩增机制,导入以上 RNA 产生的 RNAi 作用不可避免的具有瞬时性。为了克服这个弱点,一些研究小组发展了基于 DNA 载体在体内表达 siRNA 的技术。这种载体可以是质粒,也可以是病毒,甚至可以是 DNA 片段。 ( 1 )基于 RNA 聚合酶 II 启动子的表达系统:在弱或无干扰素应答反应的组织或细胞中,可以构建长的发夹 RNA ,进一步由 Dicer 剪切成 siRNA 。这种表达系统的优点是允许组织或细胞特异
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