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负80度
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3年
- 英文名:
pGreen II-0800-Luc荧光素酶质粒
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100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验2)。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到>80%的靶定基因阻断 经Dicer酶切的,来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA(d-siRNA)库,用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc,分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子,或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子
型启动子(CMV、Ubi等)终止转录的情况。载体系统也分多种,包括慢病毒载体、腺病毒载体、质粒载体等。瞬时过表达方式主要是经过人工化学修饰的运用化学方法合成的双链RNA,能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达,以增强内源性miRNA的调控作用,进行功能获得性研究。只需直接转染进入细胞,即可检测功能变化,快速,方便。miRNA靶位点鉴定:目前最为常用的miRNA靶位点鉴定方法是荧光素酶报告基因法。其基本原理是首先构建荧光素酶表达载体,将希望鉴定的miRNA靶基因的3′UTR构建到荧光素酶
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