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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pCDH-CMV-KLHL29-HA-EF1-Puro
- 库存:
大量
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
| 别名 | NM_052920.2;KBTBD9 |
| 启动子 | CMV |
| 复制子 | pUC |
| 原核抗性 | Amp |
| 筛选标记 | Puro |
| 克隆菌株 | Stbl3 |
| 培养条件 | 37度 |
| 备注 | 2625bp |
| 质粒宿主 | 慢病毒 |
| 质粒用途 | 蛋白表达 |
| 片段类型 | ORF |
| 片段物种 | 人 |
| 原核抗性 | Amp |
| 真核抗性 | Puro |
| pBluescriptR-MORC3(1点突变1同义突变)质粒 |
| pCR4-TOPO-SNX18(2同义突变1点突变)质粒 |
| pBluescriptR-SNX18(2同义突变)质粒 |
| pOTB7-EHD4(2同义突变)质粒 |
| pEnCMV-NAGPA-3×FLAG(2同义突变)质粒 |
| pCDNA3.1-AURKB-2-3×HA质粒 |
| pEnCMV-EGFR T790M-3×FLAG质粒 |
| pET16b-recA promoter-2-EGFP质粒 |
| pEnCMV-THBS1-3×FLAG质粒 |
| pCDNA3.1-PDCD11-3×FLAG质粒 |
| pGH-hADH1B质粒 |
| pCDNA3.1-LOC100506403质粒 |
| pGH-hADH7质粒 |
| pGH-ADH2质粒 |
| WWP-Luc (p21/WAF1 promoter)质粒 |
| pGH-Ptx3-m质粒 |
| pOTB7-TMEM59质粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-SIX3-shRNA1质粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-IL1B-shRNA1质粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-SLC7A5-shRNA1质粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-MET-shRNA1质粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-EXO1-shRNA1质粒 |
| pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-DLGAP5-shRNA1质粒 |
| pEnCMV-BRAF-3×FLAG质粒 |
| pECMV-3×FLAG-Adh5-m质粒 |
质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul ddH2O 溶解质粒,然后转化进相应的感受态中,再挑取单菌落提取质粒(提供图谱 序列 测序报告 售后)暂时不使用可先放置于-20℃保存,TE缓冲液中-80℃的DNA更佳
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文献和实验1.常用载体分类:2,常用载体元件介绍:(1) 启动子:启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子;特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG,CMV,EF1a,PGK等,还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子;常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn,投射神经元特异性启动
会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒(cDNA / ORF) 外源启动子(CMV、EF1α 等)驱动,表达量与内源调控完全脱钩; 通常只包含单一 CDS,不含内含子和 UTR; 表达量可达到内源的几十到几百倍; 可携带标签(FLAG、HA、GFP)方便检测。 CRISPRa(dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag) 失活 Cas9(dCas9)融合转录激活域,被 gRNA 引导至靶基因启动子区; 激活的是内源位点,转录本包含完整的内含
强启动子(如 CMV、EF1a)下,细胞大量生产该蛋白;干扰是把 shRNA 挂 U6 启动子,走 RNAi 降解 mRNA;敲除是用 Cas9 在基因组切一刀,让编码框乱码、蛋白彻底失活。三者的"作用层"不一样:过表达和干扰动的是 RNA/蛋白量,敲除动的是基因组本身。编码基因的过表达通常只需要过表达编码区(CDS)部分即可,不一定要带上启动子、5'/3'UTR,这就省了不少载体空间。 把这个细节也想清楚 过表达、干扰和敲除回答的是不同科学问题。 过表达看“增加后会怎样”,干扰看“降低后会
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