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大量
- 英文名:
1×PI Staining Solution(50ug/ml,含RNase)
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一年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
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-20°C
- 规格:
10ml
中文名:1×PI染色液(50ug/ml,含RNase)
英文名:1×PI Staining Solution(50ug/ml,含RNase)
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20°C
产品简介
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物, 能够嵌入碱基之间实现与 DNA 结合。这种结合没有或者几乎无序列倾向性,大约每 4-5 个 DNA 碱基对结 合一个染料。PI 也能与 RNA 结合,需要用核酸酶处理来区分 DNA 和 RNA 染色。水溶液中 PI 的最大激 发/发射波长是 493/636nm。一旦与核酸结合,荧光信号明显增强 20-30 倍,最大激发波长向红色波段迁移 ~30-40nm,最大发射波长向蓝色波段迁移~15nm,从而使其最大激发/发射波长变为 535/617nm。
PI 的摩尔 吸光系数相对比较低,但是其具有足够大的斯托克司频移来同时检测核酸 DNA 和荧光标记抗体,只需要 使恰当的滤片。PI 适用于荧光显微镜,共聚焦显微镜,流式细胞仪以及荧光计分析。 PI 不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用这一特性,通 常与 Calcein-AM、Hoechst 33258 或 Hoechst 33342 等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染 色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究。也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包 括直接或者间接的荧光抗体检测,mRNA 原位杂交,细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色。PI 的单独染色也可以进行细胞周期的检测
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文献和实验离心10min收集细胞; (5)将细胞重悬于含100ug/ml RNase A和50ug/ml PI的PBS中,室温孵育30min; (6)将经PI染色和RNase A消化后的细胞悬液用300目的尼龙膜过滤后即可利用流式细胞仪进行细胞周期分布和凋亡细胞定量的分析。 3、Q:流式检测细胞周期时加RNA酶所需的温度? A:其实有关RNA酶在凋亡检测制样过程中使用的必要性问题尚有人持不同意见,该观点的人认为RNA酶在环境中无所不在,常规制样过程中所接触的试剂和环境中的RNA酶已足以降解
.Na2,(pH8.0)2. 细菌裂解液: 0.2 mol/L NaOH,1% SDS3. 中和液: 60 mL 5M 醋酸钾,11.5 mL 冰醋酸,28.5 mL 双蒸水4. 3 mol/L NaAc (pH 5.2)5. TE 饱和酚 (pH8.0)6. 氯仿/异戊醇 = 24:17. RNase(20 mg/mL)【实验方法与步骤】(一)质粒的小量制备:1. 将 5 mL LB 培养液 (含筛选抗生素) 加入到容量为 15 mL 并通气良好的试管中,然后将转化菌的一个单菌落接种于培养
(4)PBS洗涤一次,200×g离心10min收集细胞; (5)将细胞重悬于含100ug/ml RNase A和50ug/ml PI的PBS中,室温孵育30min; (6)将经PI染色和RNase A消化后的细胞悬液用300目的尼龙膜过滤后即可利用流式细胞仪进行细胞周期分布和凋亡细胞定量的分析。 3、Q:流式检测细胞周期时加RNA酶所需的温度? A:其实有关RNA
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