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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
1×DAPI Staining Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
-20 °C
- 规格:
10ml/50ml
中文名:1×DAPI染色液(即用型)
英文名:1×DAPI Staining Solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20 °C
产品简介
DAPI 染色液是经过精心优化几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。 DAPI 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链 DNA 结合后可以产生比 DAPI 自身强 20 多倍的荧光。和 EB(ethidiumbromide)相比,对双链 DNA 的染色灵敏度要高很多倍。
DAPI 染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI 也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA 染色。
DAPI 的最大激发波长为 340nm,最大发射波长为 488nm;DAPI 和双链 DNA 结合后,最大激发波长为 364nm,最大发射波长为 454nm。本 DAPI 染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
使用说明
1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI 染色。
2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。
3. 室温放置 3-5 分钟。
4. 吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项
1、 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测
2、 DAPI 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验。 抗体孵育 吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4 ℃ 孵育过夜。 加荧光二抗: PBST 浸洗爬片 3 次,每次 3 min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中 37℃ 孵育 1 h,PBST 浸洗爬片 3 次,每次 3 min。 注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。 固定拍照 复染核:滴加 DAPI 避光孵育 5 min,对标本进行染核,PBST 5 min×4 次洗去多余的 DAPI。 用吸水
DAPI工作液,室温保湿孵育5min。2)1×TBST buffer浸洗玻片,室温浸片3min。3)用灭菌水洗片2min。4)待玻片微干,用移液器在玻片上滴加超强抗淬灭封片剂,浸没样本区域。5)加盖玻片,指甲油封片。6)阅片。本试剂盒仅供科研使用。
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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