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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
1×Hoechst 33342 Staining Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
10ml/50ml
中文名:1×Hoechst 33342染色液(即用型)
英文名:1×Hoechst 33342 Staining Solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20℃
产品简介
Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。常用于细 胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也用于普通的细胞核染色,或常 规的 DNA 染色。Hoechst-DNA 的激发和发射波长分别 350nm 和 460nm。
本 Hoechst 33342 染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染 色。
使用方法
1.对于固定的细胞或组织
a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色, 则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进 行其它染色,则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33342 染色液,覆盖住样品即可。对于悬 浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。室温放置 3-5 分钟。
c. 吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细 胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织:
a. 加入适当量 Hoechst 33342 染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一 个孔需加入 1ml 染色液,对于 96 孔板一个孔需加入 100 微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度培养 20-30 分钟。弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可 进行荧光检测。
注意事项:
1、荧光染料易淬灭,建议染色后尽量当天完成检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液 3、 Hoechst 33258 对人体有害,请注意适当防护。请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。C. 去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。E. 用PBS
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