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- GOY-L7325
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温冷藏
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
RT-LAMP kit for Newcastle disease virus (= avian paramyxovirus)
- 库存：
36
- 供应商：
上海谷研
- 规格：
50T
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验鸡新城疫，俗称鸡瘟，是由副粘病毒引起的一种主要侵害鸡的急性、高度接触性和高度毁灭性的疾病。临床上表现为呼吸困难、下痢、神经症状、粘膜和浆膜出血，常呈败血症。 各种日龄的鸡以及一年四季都可发生，尤以寒冷和气候多变季节多发。 1 、诊断要点 排黄绿色稀粪，混少量血液，后排蛋清样粘液，显性型急性败血症，呼吸困难、嗉嚷积液、神经机能紊乱、扭歪脖子、腺胃出血，肠粘膜有纤维素性坏死、溃疡。发病率和死亡率高。隐性型症状不明显，产蛋质量差、数量
D+R D或R + + + + - + + + + - - - - + + *D=DNA（脱氧核糖核酸）；R=RNA（核糖核酸） **有些细菌与立克次氏体对干扰素也敏感。 第一节 病毒的形态与结构 一、病毒的大小与形态 病毒个体微小，测量病毒大小的单位是毫微米（nm），即1/1000微米。在型病毒（如牛痘苗病毒）约200～300
，SVDV和VSV特异性扩增的3对引物，并通过对扩增体系和扩增条件的优化，建立了特异、敏感、快速的能同时检测FMDV，SVDV和VSV的多重RT-PCR方法。 1 材料与方法 1.1 病毒株 猪水疱病病毒RNA、标淮阳性血清、标淮阴性血清和参考样品由英国动物卫生研究所Pirbright实验室惠赠;VSV-NJ病毒株和VSV-IND病毒株从美国国家兽医服务实验室（NVSL）引进，由本实验室保存；FMDV O疫苗株从云南保山疫苗厂引进，由本实验室保存。 1.2 试剂
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