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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
0.5% Evans Blue staining solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
100ml
中文名:0.5% 伊文斯蓝染色液
英文名:0.5% Evans Blue staining solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
产品简介产品说明:
伊文斯蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝,分子式 C 34 H 24 N 6 Na 4 O 14 S 4 ,分子量为 960.80,CAS 号为 314-13-6。
伊文斯蓝与台盼蓝都是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞因有外排功能而无法被伊文斯兰染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝 色。因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞,但无法区分死亡与坏死。
使用说明:
(一)血脑屏障通透性
1、 取处理后的实验动物(以小鼠为例),静脉注射伊文斯蓝染色液,小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5~1h 后处死小鼠,取目的脑组织。
2、 脑组织置于1.5mL离心管中,加入1mL PBS, 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆,离心。
3、 取上清,,4℃孵育。该步骤亦可采用如下操作: 取上清,按上清:=3:7 ,室温孵育 24h。
4、 离心15min。
5、 取上述溶液,用分光光度计测 620 nm 处吸光值(OD 值)。同时测定已知不同梯度的标准伊文斯蓝的 OD 值,绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测样品的伊文斯蓝含量。
(二)活细胞染色
1、取 100μL 重悬细胞到离心管内,加入 100μL 伊文斯蓝染色液轻轻混匀染色(染色时间可适当延 长,但不宜超过10min)。
2、吸取少量经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细 胞样品至少数 500 个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%
注意事项:
1、 Evans Blue Stain 对人体有轻微毒性,请小心防护。
2、 细胞染色时,注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。
3、 血脑屏障通透性实验中,Evans Blue Stain 注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。
4、 最好采用低温冷冻离心机进行离心。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验附录I 染色液的配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6,53) A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏 (Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6) A液:碱性复红(basic
四、醋酸洋红染液 将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。 五、硫堇染液(工作液) ①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用; ②醋酸钠缓冲液:醋酸钠・3H2O 9.7g,巴比
一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 A液:美蓝(methyleneblue)0.6 g 95%酒精30 ml B液:KOH 0.01 g 蒸馏水:100 ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液:碱性复红(basicfuchsin)0.3 g 95%酒精 10 ml B液:石炭酸 5.0 g 蒸馏水 95 ml 将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液
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