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文献和实验手伸入板中相邻的样本孔中,吸上大约1µl的DNA样液,分别点在处理过的载玻片上。通过交叉的方式,用适合96孔板的4根一束针头或384孔板的16根一束针头成功地将数千个DNA样本点在一个玻片面上。用束状点样针接触每张玻片表面,可同时成功点100-200张具有同样阵列的芯片。每点完一次后,要清洗、干燥点样针,然后再装载另几个DNA样液。点完所有的点阵之后要处理玻璃片,使得DNA固定在玻片表面,以最大限度地减少探针非特异性结合在芯片上。MICROARRAY已被用于很多不同的目的。通过MICROARRAY
表面的透明软骨,以磷酸缓冲液(PBS含青霉素、链霉素各100U/L)冲洗2遍,将软骨剪切成1-3mm3 左右碎块,0.25%胰蛋白酶先消化30-35分钟,PBS浸洗2遍;后置于50ml玻璃培养瓶,加0.1%Ⅱ型胶原酶(DMEM配制),37消化3.5-4.5小时,每小时置37℃恒温振荡箱振荡5min。直到软骨块大部分呈肉眼可见的絮状物,倒置显微镜下观察,软骨细胞大部分分离后,以弯头吸管轻轻吹打,细胞悬液以1200r/min离心7分钟,弃上清,以含10%新生牛血清DMEM的培养液终止消化,离心弃上清
。先预冷切片的底座. 然后再将标本放在底座上预冷. 由于标本表面含有水分. 自然就会与底座粘紧。预冷至标本表面长白霜. 所需时间长短不一. 1c M3大小的标本. 约需5 Min。 4. 包埋时. 由下到上. 尽量均匀涂抹. 不要留空隙. 特别是底部. 螺旋状向上盘旋。标本周围包埋剂的厚度在1-2 M M之间. 底部3-4 M M为宜。 5. OCT包埋剂不能包的太多或太少。太多. 切出来的脑组织切片容易卷曲;太少.
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