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- 康宁Costar
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- 2025年07月13日
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文献和实验表面的透明软骨，以磷酸缓冲液（PBS含青霉素、链霉素各100U/L）冲洗2遍，将软骨剪切成1－3mm3 左右碎块，0.25%胰蛋白酶先消化30-35分钟，PBS浸洗2遍；后置于50ml玻璃培养瓶，加0.1%Ⅱ型胶原酶(DMEM配制)，37消化3.5－4.5小时，每小时置37℃恒温振荡箱振荡5min。直到软骨块大部分呈肉眼可见的絮状物，倒置显微镜下观察，软骨细胞大部分分离后，以弯头吸管轻轻吹打，细胞悬液以1200r/min离心7分钟，弃上清，以含10％新生牛血清DMEM的培养液终止消化，离心弃上清
。先预冷切片的底座. 然后再将标本放在底座上预冷. 由于标本表面含有水分. 自然就会与底座粘紧。预冷至标本表面长白霜. 所需时间长短不一. 1c M3大小的标本. 约需5 Min。 4. 包埋时. 由下到上. 尽量均匀涂抹. 不要留空隙. 特别是底部. 螺旋状向上盘旋。标本周围包埋剂的厚度在1-2 M M之间. 底部3-4 M M为宜。 5. OCT包埋剂不能包的太多或太少。太多. 切出来的脑组织切片容易卷曲；太少.
。 紫外灯不仅对皮肤、眼睛伤害，且对培养细胞与试剂等也产生不良影响，因此，不要开着紫外等操作。 2、高温湿热灭菌:压力蒸汽灭菌是最常用的高温湿热灭菌方法。对生物材料有良好的穿透力，能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡。布类、物、璃器皿、属器皿、胶和某些培养液都可以用这方法灭菌。 不同压力蒸汽所达到的温度不同，不同消毒物品所需的有效消毒压力和时间不同。从压力蒸汽消毒器中取出消毒好的物品（不包括液体），应立即放到60-70℃烤箱内烘干，再贮存备用，否则，潮湿的包装物品表面容易为微生物污染。煮沸消毒
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