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文献和实验灯进行整体消毒。长期未使用的细胞房在实验前需要用 20% 乙酸蒸 24 h。2. 二氧化碳培养箱消毒二氧化碳培养箱定期需要用 70% 乙醇擦拭托盘和内壁,同时使用手提紫外灯进行消毒。培养箱低端托盘的水也要为无菌水,并两周更换一次。3. 器皿灭菌、消毒玻璃器皿和螺口盖采用高压灭菌(121 ℃,100 kPa,20 min),玻璃器皿包括移液管、冻存瓶、盖玻片、载玻片、玻璃注射器、玻璃试管、吸管等。 螺口盖的盖子分为有內垫的金属或酚醛树脂盖、聚丙烯盖子、硅树脂盖子、白橡胶盖子。塑料器皿的消毒通常采用紫外
. 真空离心干燥 3~5 分钟,或放在室温下使乙醇完全挥发掉。 12. 沉淀用30 μl DEPC-H2O溶解。如发现沉淀难溶,68 ℃处理 10 min。 13. RNA检测 (1)测定样品在260 nm和280 nm的吸光值 按1OD=40 μg/ ml RNA计算RNA的产量。OD260/OD280在1.8-2.0 。 (2)进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳确定RNA的完整性和污染情况。 低得率:A.样品裂解或匀浆处理不彻底;B.最后得到的 RNA 沉淀未完全溶解。
4.溴酚蓝指示剂点样缓冲液 5.1mg/ml溴化乙锭溶液 6.电泳缓冲液(TAE) 7.0.7% 琼脂糖凝胶(用TAE电泳缓冲液配制) (三)器材 1.5ml Eppendorf管 200ml吸头 (四)仪器 微量移液器 离心机 恒温水浴锅 电泳仪 水平电泳槽 透射紫外观察仪 实验步骤 1. 取一个灭菌的Eppendorf管,依次加入下列试剂: 双蒸馏无菌
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