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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
RTS Arctic(DE3)表达感受态细胞
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
-20
- 规格:
10T
| RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为信裕生物独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存7天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS表达感受态细胞均为热激感受态细胞,转用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经42°C热激1min可获得105~106cfAu/μg效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。 | ||||||||
组分 |
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储存 |
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| RTS系列感受态为干粉形式,均可室温保存3天,长期保存-20°C(2年)。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C以下可保存6个月。 | ||||||||
使用方法 |
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| 1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。 |
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文献和实验最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正。 1. 首先介绍一下背景。载体是invitrogen公司的pET22b,Amp抗性。菌株是该公司的BL21 star DE3,是一个蛋白降解酶突变菌株,也就是说是一种优化表达菌株。 2. 第一次失败。第一次做诱导的时候,重复了很多次,但总是诱导不出来。PCR,酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明是引物
sbc 低温诱导==16摄氏度 换菌株?不要用单纯的BL21(DE3)==貌似有些菌株有助于可溶性表达,具体名字不记得了。 减少诱导的时间? 实在不行,就真核表达吧。。。肿瘤细胞系转染之类。 good luck! 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。从园子里也学到不少。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正。1. 首先介绍一下背景。载体是novagen公司的pET22b,Amp抗性。菌株是Invitrogen的BL21 star DE3,是一个蛋白降解酶突变菌株,也就是说是一种优化表达菌株。2. 第一次失败。第一次做诱导的时候,重复了很多次,但总是诱导不出来。PCR,酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明
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