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- 泽叶生物
- ZY3808A
- 中国/上海
- 2025年07月13日
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18
- 英文名：
LAMP-TaqMan扩增试剂盒
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件：
-20
- 规格：
48T/100T
LAMP-TaqMan扩增试剂盒
| LAMP（Loop-mediated isothermal amplification）是一种新型的滚环扩增技术,在恒温条件下，呈指数级别放大核酸分子，30分钟内将DNA放大109~1010倍。其快速、恒温的独特技术优势，使得LAMP技术成为开发诊断试剂的明星潜力技术。由于在LAMP扩增中用到很高浓度的引物，因此难免保证有少量错配和引物Dimer，这些轻微的污染都会导致LAMP高速的扩增中造成假阳性检测。无论采用SYBR Green、浊度、HNB等各种显色方法都很难产生高特异性的信号。因此从公布至今有近20年的时间，其仍然无法在诊断试剂领域获得广泛应用。因此，将类似标准定量PCR中的TaqMan探针技术应用到LAMP检测中，一直是分子生物家追求的目标。至今，虽有多种探针设计方案，但均无法满足准确、可靠、快速的要求。 2019年，信裕生物在开发非洲猪瘟快检试剂的实验过程中，由分子生物学工具酶领域的专家-张森博士领导的研发团队研发出了具有链置换活性和探针切割活性的DNA聚合酶-Bst 5.0，并将该酶成功用于LAMP和TaqMan探针组成的荧光检测系统上。应用该项技术后，在利用LAMP快速、高灵敏度、恒温检测优点的基础上，彻底解决了LAMP技术的假阳性问题。将TaqMan探针应用于LAMP扩增体系后，为LAMP技术更加广泛的应用于临床诊断奠定了坚实的基础。 注：本产品为定制开发型产品，具体信息请来电或邮件咨询。如需订购，请发送基因序列信息至信裕生物, 我公司负责引物和探针的制备。 |
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主要特征 |
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LAMP TaqMan与TaqMan PCR的原理比较 |
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LAMP TaqMan与TaqMan PCR的差异比较 |
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LAMP TaqMan与TaqMan PCR的敏感性和特异性比较 |
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| 以非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）外膜蛋白P72为靶基因（GenBank No.:AY578706）为例, 分别应用LAMP-TaqMan和TaqMan qPCR法检测相同模板（标准质粒和病样），对其检测结果进行比较如下。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1、采用标准质粒进行灵敏度测试 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 结果显示TaqMan PCR法在100 copy以上是容易判读的，在10 copy以下并不容易判读；而LAMP TaqMan在5 copy的情况下仍然扩增有力，可以清晰判读。这得益于LAMP 107/min的复制能力，从扩增曲线可得知，在起峰后2~3min内，信号即可达到平台期，而且总体反应时间<20min，15min即可判读结果。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2、采用制备的病料DNA基因组进行灵敏度测试 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 将病料基因组DNA做梯度稀释进行测试，结果显示TaqMan PCR法在pg级（25~50 copy）以上是容易判读；而LAMP TaqMan在fg水平的情况下仍然可以清晰判读。从结果来看128fg的基因组DNA中含有单copy的病毒分子。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3、对低浓度模板的检测稳定性比较 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 结果显示TaqMan PCR法在5到10 copy的模板量条件下（8重复实验），判读较困难。而LAMP TaqMan在2 copy模板的条件下仍然清晰且稳定地判读（8重复实验）。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 4、LAMP TaqMan在便携式恒温荧光检测仪上的表现 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 结果显示：在小型便携式恒温荧光检测仪上，LAMP TaqMan同样表现出色。其表现出来的敏感性、特异性、稳定性、结果的可靠性，远远超出任何其它恒温检测技术。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5、LAMP TaqMan对于低病毒含量粗制样品的检测较TaqMan qPCR效果更佳 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 结果显示：对于病毒含量极低的样品采用粗制品检测，LAMP-TaqMan方法检测的4个样品扩增有力，结果更加清晰可判，因此LAMP-TaqMan方法完全符合低病毒含量样本粗制品的检测要求。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
LAMP TaqMan试剂形式 |
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| 由于LAMP TaqMan引物和探针组合的设计工作仍然有相当的难度和不确定性，目前信裕生物提供的仅为代开发和委托生产形式，销售和开发版权归属委托单位（但必须获得信裕生物的技术授权）。在不久的将来，信裕生物将推出设计软件，并将所有诊断试剂开发流程开放。目前信裕生物提供的为冻干全试剂状态，冻干品包含Bst 5.0 DNA聚合酶、引物探针、dNTP和保护剂等，复溶后（为1x浓度）直接使用，提供50T/瓶和单支装两种形式。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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文献和实验长度可达 20kb，适合于各种 GC 含量的扩增，可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb，甚至于 2kb/s。如此卓越，爱不释手了吧？ 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒，直接对粗品进行扩增，大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit，全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
降低二次感染新冠的风险，减轻可能感染后产生的症状的严重程度。 图2 新冠疾病中抗原特异性T细胞体外扩增及应用 货号 产品名称 作用 CT-006 细胞毒性T细胞高效扩增试剂盒 体外培养获得大量高纯度细胞毒性T细胞 CT-014 细胞毒性T细胞高效扩增试剂盒（增强版） 体外培养获得大量高纯度细胞毒性T细胞 CT-016 抗原特异性T细胞高效扩增试剂盒（SARS-COV-2）
的多重STR-PCR扩增技术平台，并在此技术平台基础上开发了“STR银染基因分型扩增 试剂 盒”，“STR荧光基因分型扩增 试剂 盒”“宠物犬STR银染基因分型扩增试剂盒”产品。同时在此技术平台基础上正在开发食品安全领域的相关检测试剂盒，如饲料中牛、羊、猪肉组织成分检测系统。
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